11.05.2021 ADVAPRO CANDOR BIOSCIENCE GMBH - IBB NETZWERK GMBH
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CANDOR Bioscience GmbH • Gegründet Januar 2004 in Münster • Inhaber geführt • 2006 Umzug von Münster nach Weißensberg bei Lindau • 2010 Umzug von Weißensberg nach Wangen • 13 Mitarbeiter, 1000 qm2 Nutzfläche 2
CANDOR Bioscience GmbH Buffer & Solutions für Immunoassays: ELISA, Lateral-Flow-Test Antikörperarrays, Western Blots, Immunhistologische Nachweise... Produkte für die • Optimierung der Zuverlässigkeit • Stabilisierung der Assaykomponenten • CANDOR ist DIN EN ISO 9001:2008 zertifiziert, • seit Juli 2020 zusätzlich ISO 13485:2016 zertifiziert • OEM-Ware mit volumenabhängigen Staffelpreisen 3
CANDOR Buffers & Solutions Produktgruppen: • Immobilisierung (Coating Buffer) • Blockierung (The Blocking Solution, SmartBlock, BSA-Block) • Assaypuffer zur Minimierung von Störeffekten (Sample Buffer, LowCross-Buffer (MILD, CLASSIC, STRONG)) • Stabilisierung der Komponenten: Fängerantikörper, Standards, Detektorantikörperkonjugate (Liquid Plate Sealer, Antibody Stabilizer, HRP-Protector, LowCross-HRP, AP-Stabilizer, AP-Protector, kundenspezifische Stabilisatoren) 4
Optimierung der Zuverlässigkeit Was wollen wir erreichen? • Verhinderung von Störeffekten • Verhinderung von Falsch-Positiven / Falsch-Negativen • Verbesserung der Präzision und Richtigkeit • Verbesserung der analytischen und klinischen Spezifität und Sensitivität • Verbesserung der Stabilität aller Assaykomponenten Realisierung von Immunoassays, die nahezu nicht mehr von Störeffekten betroffen sind und gleichzeitig Verzicht auf Kühlung bei Transport und Lagerung. 5
Stabilisierung von Proteinen: • z.B. Fängerantikörper, Fängerproteine • Proteine, die als Standard eingesetzt werden • Enzym-gelabelte Detektorantikörper 6
Stabilisierung von Proteinen: • IVD: Tumormarker, Oberflächenproteine von Viren und Bakterien (Infektiologie), Allergie- Antigene, Autoimmun-Antigene… • Lebensmittelanalytik: Mykotoxine, Allergene… • Antibiotika 7
Stabilisierung von Assaykomponenten Stabilisierung von Fängerantikörpern auf Oberflächen: Liquid Plate Sealer, Liquid Plate Sealer plus und Liquid Plate Sealer animalfree 8
Immobilisiert wurde ein monoklonaler Maus-Anti-Donkey-IgG Inkubation: 84 Tage 4 37 °C T0 BSA-Block 3,5 3 2,5 T0 BSA-Block + OD 450 nm LPS 2 1,5 T84 BSA-Block 1 0,5 T84 BSA-Block + 0 LPS 0,1 1 10 100 1000 Donkey-IgG-HRP [ng/ml] 9
Stabilisierung von Assaykomponenten Stabilisierung von Fängerantikörpern auf Oberflächen: Liquid Plate Sealer – Fängerantikörper 995 Tage bei 45 °C 120 100 99,7 100,1 101,3 101,3 100 97,9 96,8 91,1 80 T0 T91 T162 Bindungsaktivität [%] 60 T252 T312 T670 T776 40 T995 20 0 10
Stabilisierung von Assaykomponenten Stabilisierung der immobilisierten RBD von SARS-CoV-2 auf Oberflächen: Stabilisierung mit Liquid Plate Sealer – Fängerantigen RBD 28 Tage bei 37 °C RBD ohne Stabilisierung: RBD mit Stabilisierung: schnelle Denaturierung der RBD Denaturierung der RBD verhindert, führt zu einer schnellen Abnahme der spezifische Antikörperbindung bei Antikörperbindung bei positiven Seren positiven Seren bleibt somit erhalten 11
Stabilisierung von Assaykomponenten Entwicklung von proteinfreien Stabilizern: Stabilisierung von HRP-markierten Detektorantikörpern Stresstest 45 °C, Lagerung 378 Tage 12
ELISA-Entwicklung: Tumormarkerprojekt Stresstest über 224 Tage bei 45 °C: 13
Bekämpfung von Störeffekten 14
Störungen durch endogene Proteine z.B. Albumine, CRP, Cytokeratine, Komplement, Lysozym, Lipide, IgG4, Alpha-1Antitrypsin… Falsch-negativ Falsch-negativ Falsch-positiv Falsch-negativ 15
Störungen durch endogene Proteine z.B. heterophile Antikörper, humane Anti-Maus-Antikörper, Rheumafaktoren… E F G H * Detektorantikörper, gelabelt * * A * A Analyt Fängerantikörper * Heterophiler Antikörper A A bzw. HAMA Blockierungsprotein der Oberfläche Korrekt Falsch-positiv Falsch-negativ Falsch-negativ 16
Vermeidung von Störungen durch endogene Proteine falsch-positive endogener Störer unbekannter Art in Meerschweinchenserum Quervernetzung zwischen Fänger und Detektorantikörper falsch-positive mit LowCross Buffer [Ergebnisse zur Verfügung gestellt durch Dr. Specht, VIVO Science GmbH (Gronau)] 17
Störungen durch endogene Proteine beim Antigen-Coating-Format: Quervernetzung des immobilisierten Antigens durch ein endogenes Protein mit dem Detektorantikörper. Dieses führt zu einem Falsch-positiven Signal korrektes Signal falsch-positives Signal 18
COVID-19-Antikörpernachweis, Bindung an RBD: Wirkung von LowCross Buffer® auf negative, aber falsch-positive Seren (Prä-COVID-Seren) 19
COVID-19-Antikörpernachweis, Bindung an RBD und Nucleocapsid: Vergleich negative und positive Speichelproben 20
COVID-19-Antikörpernachweis, Bindung an RBD Verlauf der Antikörperentstehung nach COVID-19-Erkrankung in Speichel 21
COVID-19-Antikörpernachweis, Bindung an RBD und Mutanten Verlauf der Antikörperentstehung nach Impfung in Speichel 22
COVID-19-Antigennachweis aus Speichelproben Entwicklung eines Extraktionspuffers, der SARS-CoV-2 und weitere humanpathogene Viren eliminiert: 23
Durchführung in einem S3-Labor mit infektiösen Viren Institut für molekulare Virologie, Universitätsklinikum Ulm: Prof. Dr. Jan Münch Carina Conzelmann M.Sc., Tatjana Weil M.Sc., Lena Rauch M.Sc. Lia Olari M.Sc. 24
Influenza A Herpes simplex 1 IAV HSV-1 virus in PBS virus in saliva virus in PBS virus in saliva Safety Safety Safety Safety PBS Tector PBS Tector PBS Tector PBS Tector 10 7 10 6 10 6 10 5 TCID50/ml TCID50/ml 10 5 10 4 10 4 10 3 10 3 10 2 10 2 15 15 15 15 1 5 1 5 1 5 1 5 15 15 15 15 1 5 1 5 1 5 1 5 Incubation time (min) Incubation time (min) Institut für molekulare Virologie, Universitätsklinikum Ulm: Prof. Dr. Jan Münch Carina Conzelmann M.Sc., Tatjana Weil M.Sc., Lena Rauch M.Sc. Lia Olari M.Sc. 25
COVID-19-Antigennachweis aus Speichelproben: Antigen-Schnelltest Einsatz von 26
COVID-19-Antigennachweis aus Speichelproben: Einsatz von PCR-positive Patienten-Speichelprobe zu Beginn der Erkrankung, Patient hat nur schwache Symptome 27
CO2-neutrale Produktion Die Produktion bei der CANDOR Bioscience erfolgt CO2-neutral. Seit 2010 wird CANDOR ausschließlich mit Ökostrom von den EWS (Elektrizitätswerke Schönau) beliefert, der ohne fossile Brennstoffe und ohne Atomkraft produziert wird. Alle Bereiche im Unternehmen wurden auf Ihre Energieeffizienz hin optimiert und die Beleuchtung wurde im Zuge dessen komplett auf LED-Beleuchtung umgestellt. So minimieren wir den Energieverbrauch und damit auch Kosten. Im Jahr 2014 wurde dann die Gasheizung des Gebäudes durch eine energieeffiziente elektrisch betriebene Wärmepumpe ersetzt. Der Energiebedarf sank dadurch erneut deutlich. Damit wird sowohl der Stromverbrauch für die Produktion und die Büros als auch der Energiebedarf für die Heizung vollständig durch Ökostrom gedeckt. 2014 wurden für die Mitarbeiter Firmenfahrräder und E-Bikes eingeführt (wer will) Seit 2020 Ladestationen für Elektroautos und Installation einer Solaranlage für Eigenstrom
CANDOR Produktion • Einzelchargen von 10 L bis 1200 L • Parallele Produktion • Reinstwasser-Anlage mit 600 L pro Stunde
Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! www.candor-bioscience.de Ihr technischer Ansprechpartner: Dr. Peter Rauch, Geschäftsführender Gesellschafter Tel.: 07522 / 79 52 71 2 p.rauch@candor-bioscience.de
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