ULLeeiissttuunnggssvveerrzzeeiicchhnniiss - Institut für Virologie Leitung: Prof. Dr. Thomas F. Schulz - Medizinische Hochschule Hannover
←
→
Transkription von Seiteninhalten
Wenn Ihr Browser die Seite nicht korrekt rendert, bitte, lesen Sie den Inhalt der Seite unten
Institut für Virologie Leitung: Prof. Dr. Thomas F. Schulz Leistungsverzeichnis U 25. Ausgabe Stand: Juli 2018
Leistungsspektrum Institut für Virologie Herausgeber: Institut für Virologie Medizinische Hochschule Hannover Prof. Dr. med. Thomas F. Schulz Carl-Neuberg-Str. 1 30625 Hannover e-mail: schulz.thomas@mh-hannover.de U Die jeweils aktuellste Version des Leistungsverzeichnisses finden Sie auf unserer Homepage: www.mh-hannover.de/virodiagnostik.html 1TU U1T Hinweis: Dieser Leistungskatalog stellt die im Institut für Virologie zum Ausgabedatum angebotenen und durchgeführten diagnostischen Untersuchungen vor und beruht auf dem derzeitigen medizinischen Wissenstand. Im Lauf der Zeit können neu Untersuchungsmethoden hinzukommen, durch andere ersetzt oder nicht mehr angeboten werden. 23.07.2018 1
Leistungsspektrum Institut für Virologie Einleitung Im Institut für Virologie der Medizinischen Hochschule Hannover wird ein breites Spektrum virologischer Untersuchungen in Blut, anderen Körperflüssigkeiten und aus Biopsiematerial durchgeführt. Dieses umfasst neben modernen molekularbiologischen Methoden zum Nachweis, zur Typisierung und zur Quantifizierung von Virusgenomen auch Methoden der serologischen Diagnostik, sowie des Direktnachweises und der Isolierung verschiedener Viren. 2003 wurde bereits ein Qualitätsmanagementsystem gemäß der DIN EN ISO 15189 implementiert, um eine wirksame Lenkung und Verbesserung der Dienstleistungsqualität während sämtlicher Phasen der Analytik zu gewährleisten. Dieses wird durch die Deutsche Akkreditierungsstelle GmbH (DAkkS) überwacht. (Die aktuelle Akkreditierungsurkunde ist auf der nächsten Seite dargestellt. Der Umfang der Akkreditierung ist aus der zugehörigen Anlage zur Urkunde zu ersehen, die auf unserer Homepage zu finden ist, s. S. 1.) Das Institut ist mit modernen Einrichtungen für die molekularbiologische, infektionsserologische sowie die Diagnostik mittels Zellkulturverfahren ausgestattet. Es steht eine ausreichende Zahl von Mitarbeitern zur Verfügung, um die erforderlichen Arbeiten zur Probenvorbereitung, Untersuchung, Dokumentation und begleitenden Dienstleistungen zu garantieren. Eine Qualitätsmaxime des Institutes ist die zuverlässige Bereitstellung von validen Untersuchungsergebnissen, die präzise, nachvollziehbar und mit denen anderer Laboratorien vergleichbar sind. Die Untersuchungsergebnisse werden in möglichst kurzen Bearbeitungszeiten zur Verfügung gestellt. Als wissenschaftliches Institut der Medizinischen Hochschule ist es uns möglich, ein möglichst aktuelles und umfassendes Untersuchungs- und Methodenspektrum anzubieten. Die Auswahl, Validierung und Einführung geeigneter Untersuchungs- methoden erfolgt stets nach dem neuesten Stand von Wissenschaft und Technik. Für Spezialuntersuchungen wird an entsprechende externe Laboratorien (wie nationale Referenzzentren oder Konsiliarlaboratorien oder andere, ebenfalls akkreditierte Laboratorien) verwiesen. Der Zweck dieses Leistungskataloges ist die Darstellung des aktuellen diagnostischen Spektrums des Institutes. Gleichzeitig soll es eine sinnvolle Inanspruchnahme der angebotenen Leistungen sowie die Interpretation der Ergebnisse erleichtern. Hannover, im August 2017 Prof. Dr. Schulz 23.07.2018 4
Leistungsspektrum Institut für Virologie Die Urkunde sowie die zugehörige Anlage sind auf unserer Homepage zu finden (s. S. 1). 23.07.2018 5
Leistungsspektrum Institut für Virologie Inhaltsverzeichnis Akkreditierungsurkunde 3 1. Anschrift, Anfahrt, Lageplan, Telefonnummern und Ansprechpartner 5 2. Verzeichnis der untersuchten Erreger (in alphabetischer Reihenfolge) 9 3. Handbuch für die Primärprobenentnahme und –Einsendung 10 3.1 Hinweise zu Probenentnahme, Untersuchungsanforderung und Transport 10 3.1.1 Untersuchungsmaterial und Probenahme 11 3.1.2 Elektronischer Laborauftrag / Probenkennzeichnung 12 3.1.3 Anforderungsformular / Kennzeichnung der Proben 13 3.1.4 Probentransport 15 3.1.5 Kriterien der Probenannahme 17 3.2 Notfalluntersuchungen U U 18 4. Untersuchungshäufigkeit, Probenarchivierung, Wiederholungsmessungen, Unteraufträge 19 4.1 Untersuchungshäufigkeit 19 4.2 Probenarchivierung und Nachforderungen 21 4.3 Medizinische Validierung, Wiederholungsmessungen, 21 Befundübermittlung und Meldepflicht 4.4 Vergabe von Unteraufträgen 22 4.5 Vorgehen bei V. a. Pocken, hämorraghisches Fieber und andere 23 hochinfektiöse, in den Tropen vorkommende Erreger) 5. Untersuchungsprogramm 25 5.1 Erreger, alphabetisch geordnet (mit Angaben zu Untersuchungsmethoden, Indikation, Material, Interpretation) 25 5.2 Erreger, nach Methoden geordnet 39 5.3 Testprinzipien, Vor- und Nachteile 42 der durchgeführten Methoden 6. Empfohlene Anforderungen bei häufigen Symptomkonstellationen 51 7. Abkürzungen 57 8. Literatur 58 9. Änderungshinweise 58 23.07.2018 6
Leistungsspektrum Institut für Virologie 1. Anschrift, Anfahrt, Lageplan, Telefonnummern und Ansprechpartner Institut für Virologie (MHH intern: OE 5230) Medizinische Hochschule Hannover Carl-Neuberg-Str. 1 30625 Hannover Anfahrt und Lage Straßenbahn-Linie 4 / Bus-Linie 123 oder 137 Haltestelle: Medizinische Hochschule Medizinische Hochschule 23.07.2018 7
Leistungsspektrum Institut für Virologie Lageplan MHH Institut für Virologie (Gebäude I6, Theoret. Institute II) Zentrallabor, Gebäude K3 23.07.2018 8
Leistungsspektrum Institut für Virologie Direktor: Prof. Dr. med. T. F. Schulz homepage: http://www.mh-hannover.de/virologie.html Telefon Fax Sekretariat 0511-532-6736 -532-8736 Eingangslabor/ Probenannahme 0511-532-4329 -532-5732 Serologie 0511-532-4281 Virusisolierung 0511-532-4318 Molekularbiologie/ PCR 0511-532-4311 Diensthabender Assistent U U 0176-1532-9555 U U (MHH intern: 17-9555) U U Rufbereitschaft U U 0176-1532-8889 (MHH intern: 17-8889) U U U U Normale Dienstzeiten U Montag – Freitag: 8.30 - 17.00 Uhr (Diensthabender) 7.30 – 16.00 Uhr (Labor) Rufbereitschaft: U U nur in wichtigen Fällen außerhalb der normalen Dienstzeiten U U Über das Rufbereitschaftshandy ist außerhalb der Dienstzeiten ein wissenschaftlicher U U Mitarbeiter erreichbar, um in dringenden Fällen Notfalluntersuchungen für folgende U U Parameter durchzuführen (s. auch S. 17): • HIV-Antikörper HCV-Antikörper • Hepatitis B-Serologie • VZV-Antikörper Probentransport bei Notfällen bitte immer mit Sonderboten!U U Externe Einsender: TAXI anfordern!!! (Mit dem normalen Probentransport kann es leider mehrere Stunden dauern, bis die Probe unser Institut erreicht.) 23.07.2018 9
Leistungsspektrum Institut für Virologie Ansprechpartner für die virologische Beratung: Name Telefon e-mail 0511 / 532- Prof. Dr. med. Thomas F. Schulz 6736 schulz.thomas@mh- Facharzt für Mikrobiologie, Virologie und hannover.de Infektionsepidemiologie Institutsdirektor, Forschungsbereich: HHV 8 / KSHV PD. Dr. med. Albert Heim 4311 heim.albert@mh-hannover.de Facharzt für Mikrobiologie, Virologie und Infektionsepidemiologie Stellvertretender Institutsdirektor, Bereichsleiter Molekularbiologie, Forschungsbereich: Adeno- und Enteroviren Dr. med. Tina Ganzenmüller 4328 ganzenmüller.tina@mh- Fachärztin für Mikrobiologie, Virologie und hannover.de Infektionsepidemiologie; Stellvertretende Bereichsleiterin Virusisolierung Forschungsbereich: Klin. Virologie (Sequenzierung) Dr. rer. nat. Ilona Glowacka 2956 glowacka.ilona@mh- Wiss. Mitarbeiterin; Fachvirologin für Medizinische hannover.de Virologie und Infektionsepidemiologie Stellvertretende Bereichsleiterin Virusisolierung und Serologie; verantwortlich für die Elektronenmikroskopie Dr. rer. nat. Wolfram Puppe 4281 puppe.wolfram@mh- Wiss. Mitarbeiter hannover.de Bereichsleiter Serologie, Stellvertretender Bereichsleiter Molekularbiologie Forschungsbereich: akute resp. Erkrankungen Dr. med. Corinna Schmitt 4326 Schmitt.corinna@mh- Fachärztin für Mikrobiologie, Virologie und hannover.de Infektionsepidemiologie Bereichsleiterin Virusisolierung und Elektronenmikroskopie Forschungsbereich: Klin. Virologie (u.a. BKV) Bitte wenden Sie sich bei Fragen, Unklarheiten, Beschwerden oder Problemen sofort an uns. Reklamationen können Sie an jeden der o. g. Ansprechpartner richten. 23.07.2018 10
Leistungsspektrum Institut für Virologie 2. Verzeichnis der untersuchten Viren (in alphabetischer Reihenfolge) Adenoviren Astroviren BK-Virus (BKV) Caliciviren (s. Noroviren) Cytomegalo-Virus (CMV) Coronaviren Epstein-Barr-Virus (EBV) Enteroviren (Coxsackieviren, Typ A und B, ECHO-Viren) Frühsommer-Meningoenzephalitis (FSME) -Virus Hantaviren (Hantaan, Puumala) Hepatitis-A-Virus (HAV) Hepatitis-B-Virus (HBV) Hepatitis-C-Virus (HCV) Hepatitis-E-Virus (HEV) Hepatitis-D-Virus (HDV) Herpes-simplex-Virus, Typ 1 und 2 (HSV-1/-2) Humanes Herpesvirus Typ 6 (HHV-6) Humanes Herpesvirus Typ 8 (HHV-8 / Kaposi-Sarkom-assoziiertes Herpesvirus (KSHV)) Humanes Immundefizienz-Virus, Typ 1 und 2 (HIV-1/-2) Metapneumovirus (MPV) Humanes T-Zell-Leukämie-Virus, Typ 1 und 2 (HTLV-1/-2) Influenzaviren, Typ A und B JC Virus (JCV) Masernvirus Mumpsvirus Noroviren Parainfluenzaviren, Typ 1, 2, 3 und 4 Parvovirus B19 Polioviren, Typ 1 und 3 Poxviren Rhinoviren Rötelnvirus Rotaviren Respiratory-Syncytial-Virus (RSV) Varicella-Zoster-Virus (VZV) 23.07.2018 11
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3. Handbuch für die Primärprobenentnahme 3.1. Hinweise zu Probenentnahme, Untersuchungsanforderung und Transport Bei der Abnahme von Patientenproben sind Einmalhandschuhe zu tragen! Bei Gefahr der Aerosolbildung / des Verspritzens sind zusätzlich Mundschutz und Schutzbrille U U U U U U zu tragen. Patientenproben sind mit sterilem Abnahmebesteck zu entnehmen und in sterilen Transportgefäßen zu befördern. Das Abnahmebesteck wie (z.B. Kanülen, Skalpelle) muss sofort nach Abnahme in geeigneten Sammelgefäßen entsorgt werden, damit andere Personen sich nicht daran verletzen können. Die Sammelbehälter dürfen nicht überfüllt und nur geschlossen transportiert werden. Wichtig: Kanülen nach Probenabnahme niemals in die Schutzhülle zurückstecken (Verletzungsgefahr!), sondern direkt in den Sammelbehälter entsorgen! U U (Einzige Ausnahme: Bläscheninhalt (s. Tabelle auf der nächsten Seite )) U U 23.07.2018 12
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3.1.1 Untersuchungsmaterial und Probenahme Material Menge / Probe Sinnvolle Untersuchungen Abstriche: Mit sterilem Tupfer über Antigennachweis (=IFT) 0B Auge* entspr. Stelle mit sanftem PCR Haut Druck streichen und in 1 Virusisolierung Schleimhaut ml physiolog. NaCl-Lsg. DNA-Hybridisierung (HPV) Nase/Rachen versenden 2 – 10 ml, steriles PCR Aszites Röhrchen (Virusisolierung) 1B Bitte Rücksprache mit PCR Biopsiematerial diensthabendem (Virusisolierung) Virologen! 2B mit Tuberkulinspritze 9B aspirieren, Kanüle mit U U Elektronenmikroskopie** 3B Bläscheninhalt Schutzkappe auf Spritze PCR belassen (Vorsicht beim Virusisolierung 4B Aufstecken der Kappe!) Antigennachweis (=IFT) 2- 10 ml, steriles 5B Bronchioalveolarlavage PCR Röhrchen Virusisolierung 6B Antigennachweis (=CMV pp65) 5 – 10 ml EDTA- 7B EDTA-Blut (Leukozyten) PCR Monovette (Virusisolierung) 8B 10 ml EDTA-Monovette PCR EDTA-Blut (Plasma) Serologie 1 – 2 ml bzw. g, Erbrochenes PCR im Stuhlröhrchen 2- 10 ml, steriles PCR Fruchtwasser Röhrchen (Virusisolierung) 0,5 – 2 ml, steriles Gelenkflüssigkeit PCR Röhrchen 2 - 5 ml in EDTA- Knochenmarkspunktat PCR Monovette mindestens 1 ml, ASI Liquor 10B steriles Röhrchen PCR (Akutphase!) mit 3-10 ml Wasser oder Antigennachweis (=IFT) Rachenspülwasser physiol. NaCl-Lösung PCR spülen Virusisolierung Serologie Serum 10 ml Serum-Monovette PCR Elektronenmikroskopie** 1 - 2 ml bzw. g Stuhl PCR 1B im Stuhlröhrchen Virusisolierung 12B Antigennachweis (=IFT) 1 - 3 ml, steriles Trachealsekret/Sputum PCR Röhrchen Virusisolierung PCR 5 - 10 ml, steriles Urin Virusisolierung Röhrchen (Elektronenmikroskopie**) * Abstrich nie mit trockenem Tupfer – Verletzungsgefahr des Auges! **Methode nicht akkreditiert 23.07.2018 13
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3.1.2 Elektronischer Laborauftrag / Kennzeichnung der Proben Die Anforderung von diagnostischen Untersuchungen erfolgt intern über den elektronischen Laborauftrag mittels KIS. Beim Anlegen des Auftrages im KIS wird eine Proben-ID generiert. Diese erscheint auf dem Auftragsetikett (als Barcode und in Klarschrift) sowie die Patientendaten, Materialart, Labornummer (24) und Einsenderkürzel. Dieses Etikett wird auf die abgenommene Probe geklebt und dient zur Auftragserfassung im Labor. Der Datensatz des elektronischen Laborauftrages beinhaltet die notwendigen Angaben zur Identifikation des Patienten (Name, Vorname, Geburtsdatum, Geschlecht, Anschrift), den Versicherungsstatus, den Entnahmezeitpunkt, Materialart sowie die gewünschte Untersuchung. Zudem werden zusätzlich die Einsenderdaten übermittelt. Eine eindeutige Identifikation der Probe ist unbedingte Voraussetzung für die Annahme U U eines Auftrages! Klinische Angaben zum Patienten (wie z.B.: Nadelstichverletzung, Z. n. aktueller Impfung, Immundefizienz / -suppression, Bluttransfusion / Immunglobulin-Gabe) sind in jedem Fall notwendig für die Befundinterpretation und können beim Anlegen eines elektronischen Laborauftrages bei Patientenstatus oder Symptomatik aus der hinterlegten Liste ausgewählt U U U U werden. Notfall/Eilanforderungen können nur nach telefonischer Ankündigung bzw. nach Rücksprache mit dem diensthabenden Assistenten (0176-1532-9555 / MHH intern: 17-9555) U U Durchgeführt werden! (s. auch unter 3.2) Informationen hierzu auch unter „Eil-Anforderung“ beim Anlegen eines elektronischen Laborauftrages der Virologie. 23.07.2018 14
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3.1.3 Anforderungsformular / Kennzeichnung der Proben 23.07.2018 15
Leistungsspektrum Institut für Virologie Die Anforderung von diagnostischen Untersuchungen erfolgt durch unser maschinenlesbares Anforderungsformular (s. S. 14). Zur Markierung sollte ein Bleistift benutzt werden. Bitte jeweils das ganze Markierungsfeld mit waagerechten Strichen schwärzen! Auf dem Formular bitte nicht radieren und das Formular nicht knicken! Bei Einsendung von mehreren Untersuchungsmaterialen eines Patienten benötigen wir für jede Probe einen Einsendeschein! U U Einsender aus der MHH kleben bitte ein Patientenetikett mit Barcode auf das dafür vorgesehene Feld. Bitte keine beschädigten Etiketten benutzen. Ist kein Etikett vorhanden, oder erfolgt die Einsendung von außerhalb der MHH, muss das dafür vorgesehene Feld mit den notwendigen Angaben zur Identifikation des Patienten (Name, Vorname, Geburtsdatum, Geschlecht, Anschrift) sowie zum Versicherungsstatus des Patienten ausgefüllt werden. Bitte unbedingt Entnahmezeitpunkt und Erkrankungsdatum, Materialart und gewünschte Untersuchung angeben! Bitte Einsendestempel, Namen des verantwortlichen Arztes und Unterschrift, sowie eine Telefon-/ oder Piepernummer für Rückfragen nicht vergessen. Externe Einsender bitte unbedingt zusätzlich die Einsenderadresse angeben! U U U U Nicht eindeutig ausgefüllte Anforderungsscheine können vom Belegleser nicht erkannt und damit der Auftrag nicht bearbeitet werden! Eine eindeutige Identifikation der Probe ist ebenfalls unbedingte Voraussetzung für die U U Annahme eines Auftrages. Wenn Sie das Feld „Diagnostikprogramm entsprechend der Fragestellung“ markieren, erfolgt die Auswahl des Testprofils durch den diensthabenden Assistenten entsprechend der Fragestellung (siehe auch: Kap.6). Hierfür müssen jedoch unbedingt die entsprechenden Felder unter Patientenstatus und Symptomatik markiert sein – sonst kann keine Untersuchung durchgeführt werden! Falls die entsprechende Symptomatik nicht auf dem Schein vorhanden ist, kann sie (oder eine Verdachtsdiagnose) im Feld „Bemerkungen“ notiert werden. Klinische Angaben zum Patienten sind in jedem Fall auch notwendig für die Befundinterpretation; denn ohne klinische Angaben (wie z.B.: Nadelstichverletzung, Z. n. aktueller Impfung, Immundefizienz/-suppression, Bluttransfusion/Immunglobulin-Gabe) oder Angaben zur Diagnose ist eine sinnvolle Beurteilung der Untersuchungsergebnisse nicht möglich. Bitte markieren Sie die entsprechenden Felder auf unserem Anforderungsformular. Nur wenn Abnahmetag und Abnahmezeit markiert sind, können Verzögerungen beim Probentransport, die Einfluss auf die Untersuchungsergebnisse haben, erkannt werden (z.B. können Abbau viraler RNA oder Degradierung behüllter Viren bei zu langem Probentransport zu falsch negativen PCR- oder Virusisolierungs-Resultaten führen). 23.07.2018 16
Leistungsspektrum Institut für Virologie Wenn einer der Untersuchungsblöcke wie ‘Screening akute Hepatitis’ oder ‘Nadelstichverletzung’ markiert wird, werden alle unter dem Untersuchungsblock aufgeführten Analysen durchgeführt: Untersuchungsblock Analysen Prä-OP-Programm HBs-Antigen, anti-HCV, anti-HIV Screening akute Hepatitis HAV-IgM, HBs-Antigen, anti-HBc, anti-HCV Nadelstichverletzung Anti-HBs, anti-HCV, anti-HIV „Empfänger“ Nadelstichverletzung HBs-Antigen, anti-HCV, HCV-Antigen, anti-HIV „Spender“ Prä-Tx-Programm Anti-HAV, HBs-AG, anti-HBs, anti-HBc, anti-HCV, anti- HIV, CMV-, EBV-, HSV-, VZV- IgG Post-Tx-Programm CMV-, EBV-, HSV-, VZV- IgM/IgG; Notfall/Eilanforderungen können nur nach telefonischer Ankündigung bzw. nach Rücksprache mit dem diensthabenden Assistenten (0176-1532-9555 / MHH intern: 17-9555) U U durchgeführt werden! (s. auch unter 3.2 ) Wissenschaftliche Studien Vor Anforderung von virologischen Untersuchungen im Rahmen wissenschaftlicher Studien ist eine Rücksprache mit dem Institutsleiter erforderlich. 3.1.4 Probentransport – allgemeine Hinweise Grundsätzlich sollte für den schnellstmöglichen Transport des Untersuchungsmaterials gesorgt werden (Transportbedingungen siehe Tabelle). Die Proben müssen in für infektiöses Material geeigneten Behältnissen und in einer flüssigkeitsdichten Umverpackung verschickt werden, um eine Infektion des Transport- und Laborpersonals zu vermeiden! Wenn Anforderungsscheine genutzt werden, sind diese von den Proben getrennt, d.h. außerhalb der Proben- Umverpackung, zu versenden, um eine Kontamination des Scheines durch Probenmaterial zu verhindern! Es wird darauf hingewiesen, dass nicht richtig verpackte Proben nicht bearbeitet werden können! Bei Abnahme der Proben am späten Nachmittag oder abends, sowie vor dem Wochenende oder am Feiertag sollten diese beim Einsender bei 4 °C gelagert und erst am darauf folgenden Werktag versandt werden, wobei Serum und Plasma innerhalb von 6 Stunden vom Blutkuchen getrennt werden sollten. Dies gilt auch vor einem längeren Transport. (Bei instabilem Material - z.B. Granulozyten für CMV-pp65-Bestimmung - ist eine Untersuchung allerdings bereits nach 3 Tagen nicht mehr sinnvoll.) 23.07.2018 17
Leistungsspektrum Institut für Virologie Untersuchungsverfahren Materialien Transport Antigennachweis: Abstriche, BAL, Schnellstmöglicher Transport; U U - Direktnachweis von Rachenspülwasser, Sputum, wenn möglich, gekühlt ! U U Virusproteinen mittels IFT Trachealsekret Untersuchung sollte innerhalb oder Ag-Schnelltest Stuhl (Rotavirus) 24 h nach Abnahme erfolgen U U können! -oder Immunperoxidase (pp65) EDTA-Blut (Leukozyten) Schnellstmöglicher Transport, (wenn möglich gekühlt.) -Antigen ELISA Serum „ Elektronenmikroskopie Bläscheninhalt, Stuhl, Urin „ (Methode nicht akkreditiert) Antikörpernachweis: Serum, EDTA-Blut, „ IgG / IgM / IgA (ELISA) Liquor PCR Abstriche, Aszites, BAL, Biopsie, Schnellstmöglicher Transport , U U Bläscheninhalt, EDTA-Blut, wenn möglich gekühlt! U U Erbrochenes, Fruchtwasser, Ausnahme: Biopsie bitte U U Gelenkflüssigkeit, Knochenmark, vorher ankündigen! Liquor, Plasma, Rachenspül- Nach tel. Rücksprache wasser, Serum, Sputum, Stuhl, Transport auf Flüssig-N 2 , R R Trachealsekret, Urin Trockeneis oder in Spezialpuffer Virusisolierung Abstriche, (Aszites), BAL, Schnellstmöglicher Transport! U U (Biopsie), Bläscheninhalt, (EDTA-Blut, Fruchtwasser), Material darf nicht eingefroren U U Rachenspülwasser, Sputum, werden! Stuhl, Trachealsekret, Urin, etc. 23.07.2018 18
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3.1.5 Kriterien der Probenannahme Proben können im Regelfall nur in den normalen Dienstzeiten angenommen werden: Montags – Freitags 7.30 – 16.00 Uhr. (Notfalluntersuchungen: s. unter 3.2 bzw. unter „Eil-Anforderung“ beim Anlegen eines U U elektronischen Laborauftrages der Virologie) Ein Untersuchungsauftrag muss leider abgelehnt werden, wenn das Material nicht eindeutig zugeordnet werden kann (eindeutige Probenkennzeichnung!), für die jeweilige Untersuchung unbrauchbar ist (z.B. falsches Material), für die jeweilige Untersuchung nicht ausreicht, fehlerhaft transportiert wurde (z.B. nicht genügend gekühlt oder im bakteriologischen Gelröhrchen versandt wurde), zu alt ist, nicht richtig verpackt wurde. Ein Untersuchungsauftrag kann ebenfalls abgelehnt werden, wenn der Anforderungsschein nicht richtig ausgefüllt worden ist. Gekennzeichnete Proben ohne Auftragsschein bzw. ohne elektronischen Laborauftrag werden, soweit stabil, max. 5 Tage kühl gelagert (Liquor wird eingefroren), um eine nachträgliche Auftragsbearbeitung zu ermöglichen. Das Institut für Virologie behält sich zudem vor, einzelne Teste aus bestimmten Proben u. U. nicht durchzuführen, wenn kein valides Ergebnis zu erwarten ist. So führt z.B. stark hämolytisches, ikterisches oder lipämisches Serum zu falschen Ergebnissen in ELISA-Testsystemen Blut im Liquor zu einem verfälschten ASI langer, unsachgemäßer Transport zu einer Degradation von RNA/ DNA und damit zu einem falsch negativen PCR-Ergebnis. Einfrieren der Proben zerstört intakte Virionen, so dass eine Anzucht nicht mehr gelingt. 23.07.2018 19
Leistungsspektrum Institut für Virologie 3.2 Notfalluntersuchungen Dringende Untersuchungen während der Dienstzeiten werden bevorzugt durchgeführt und, wenn möglich, noch am selben Tag bearbeitet. Voraussetzung ist jedoch die telefonische Absprache mit dem diensthabenden Assistenten (Tel.: 0176-1532-9555 / MHH intern: 17-9555) sowie die schnellstmögliche Anlieferung des U U Untersuchungsmaterials (Sonderbote bzw. von extern mit Taxi!) Das Untersuchungsmaterial muss bis spätestens 14.00 Uhr das Labor erreichen! (EDTA-Blut für CMV-pp65 muss bis spätestens 11.00 Uhr im Labor eingehen!)* *(Wenn möglich sollten Proben für den CMV pp65 Nachweis Anfang der Woche abgenommen und verschickt werden, um eine zu lange Verweildauer bei der Post zu vermeiden, wodurch der positive Nachweis gefährdet wäre.) Auf dem Anforderungsschein ist die Eilprobe als Notfall zu kennzeichnen. Die Befundübermittlung erfolgt nach analytischer und medizinischer Beurteilung und anschließender Freigabe vorab telefonisch oder per Rohrpost (per FAX nur unter der Voraussetzung, dass ausreichender Datenschutz gewährleistet ist) sowie zusätzlich auf dem Postweg. In dringenden Fällen außerhalb der regulären Dienstzeit bitte zunächst die Rufbereitschaft benachrichtigen (Tel.: 0176-1532-8889, MHH-intern: 17-8889) und den Versand der Probe U U besprechen. Diese Rufbereitschaft (Tel.: 0176-1532-8889, MHH-intern: 17-8889) existiert nur für genuine U U Notfälle, z.B. Stichverletzungen, Transplantationen, dringende Blutspenden und bei begründetem Verdacht auf Influenza. Im Rahmen der Rufbereitschaft werden folgende Untersuchungen angeboten: Serologische Untersuchungen - Antikörper gegen CMV, HBV, HCV, HIV - HBsAg - Syphilis Molekularbiologie - HCV PCR - HIV PCR Antigennachweis - Influenzaschnelltest bei V. a. Infektion mit Influenzaviren 23.07.2018 20
Leistungsspektrum Institut für Virologie 4. Untersuchungshäufigkeit, Probenarchivierung, Wiederholungsmessungen, Unteraufträge 4.1 Untersuchungshäufigkeit In dringenden Fällen bitte telefonische Rücksprache mit dem diensthabenden Assistenten (Tel.: 0176-1532-9555 / MHH intern: 17-9555). U U Allgemein gelten die folgenden Zeiten für die Untersuchung von Probeneingang bis Befundversand in Papierform (Abweichungen möglich): Serologische Untersuchungen Die Mehrzahl der serologischen Untersuchungen wird innerhalb eines Tages nach Eingang des Untersuchungsmaterials durchgeführt. Dies betrifft z. B. insbesondere ELISA – Tests zum Nachweis von Antikörpern gegen Hepatitis-A-, -B-, und -C-Virus, HIV-1/-2, HTLV-1/-2, CMV, EBV, HSV, VZV, FSME-, Masern-, Mumps- und Rötelnvirus sowie zum Nachweis von HBsAg, HCV-Ag und HIV-Ag. Die ELISA Tests zum Nachweis von Antikörpern gegen Adenoviren, Enteroviren, HEV, HDV und HHV-6 werden in der Regel mind. 1x in der Woche durchgeführt. Bestätigungstests (z.B. Immunoblot), sowie die Bestimmung von antigenspezifischen Indices im Liquor (ASI) erfolgen in der Regel 1-2x wöchentlich. Aufgrund der geringen Anforderungen werden serologische Untersuchungen zum Nachweis von Antikörpern gegen Hantaviren, HHV-8 und Polioviren seltener durchgeführt. Virusdirektnachweis/ Antigennachweis/ Virusisolierung Der Nachweis von Virusantigenen in Nasen-/Rachenabstrichen, BAL, Rachenspülwasser, etc. mittels indirekter Immunfluoreszenz bzw. in Stuhl mittels Ag-Schnelltest (Rotaviren) erfolgt täglich (Montag – Freitag), Der Nachweis von CMV pp65 Antigen in Leukozyten (EDTA-Blut) erfolgt ebenfalls arbeitstäglich. Die Isolierung und Identifizierung von Viren in der Zellkultur benötigt je nach untersuchtem Virus wenige Tage bis zu 4 Wochen. Bei positivem Ergebnis erfolgt eine sofortige Benachrichtigung. Die HSV-Resistenzbestimmung wird nach Bedarf durchgeführt. 23.07.2018 21
Leistungsspektrum Institut für Virologie Nukleinsäurenachweis (PCR) Hepatitis-C-Virus werktäglich HIV werktäglich CMV, HSV, VZV, EBV, HHV-6, HHV-8 werktäglich Adenoviren werktäglich Coronaviren (respiratorische) bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche BKV nach Bedarf, im Allgemeinen 2 x pro Woche Enteroviren bei Bedarf werktäglich, mindestens jedoch 1x pro Woche Hepatitis-B-Virus nach Bedarf, im Allgemeinen 1 x pro Woche Hepatitis-E-Virus nach Bedarf, im Allgemeinen 1 x pro Woche Influenzaviren, Typ A /B bei Bedarf werktäglich mind. 1x, sonst mind. 1 x pro Woche JCV nach Bedarf, im Allgemeinen 2 x pro Woche MPV bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche Noroviren bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche Parainfluenzaviren, Typ 1-4 bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche Parvovirus B nach Bedarf, sonst mind. 1 x pro Woche Rhino-/Enteroviren bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche RSV bei Bedarf werktäglich, sonst mind. 1 x pro Woche Elektronenmikroskopie (Methode nicht akkreditiert) Der Nachweis von Viruspartikeln in Bläscheninhalt, Stuhl oder Urin kann im Prinzip innerhalb weniger Stunden erfolgen. Je nach Anzahl der anfallenden Proben kann innerhalb von 1 – 3 Tagen mit einem Ergebnis gerechnet werden. Notfallproben werden noch am selben Tag untersucht. U 23.07.2018 22
Leistungsspektrum Institut für Virologie 4.2 Probenarchivierung und Nachforderungen Nach Abschluss der Untersuchungen werden die Proben in Abhängigkeit von ihrer Stabilität aufbewahrt. Serum, Plasma und Liquor werden zunächst (max. 2 Wochen) bei 4°C zwischengelagert. In dieser Zeit können weitere Untersuchungen sowie Kontrolluntersuchungen nachgefordert werden. Die Stabilität des gelagerten Materials bezüglich der jeweils nachgeforderten Untersuchung (z.B. IgM-Nachweis oder PCR) ist zu prüfen. Danach werden diese Proben bei -20°C auf Dauer tiefgefroren. DNA- und RNA-Präparationen werden direkt nach der Bearbeitung bei -20°C bzw. -80°C (RNA) auf Dauer archiviert. EDTA-Blut (2 Tage bei 4°C), Anzuchtmaterial (tiefgefroren) sowie Material für die Elektronenmikroskopie (2 Tage bei 4°C) wird nur bis zum endgültigen Befund für eventuelle Nachuntersuchungen aufbewahrt. Zusätzliche Untersuchungen können, wenn genügend Material vorhanden und die Untersuchung diagnostisch sinnvoll ist, telefonisch oder schriftlich nachgefordert werden. In Ausnahmefällen können gewisse Untersuchungen auch aus bereits archivierten Proben durchgeführt werden. 4.3 Medizinische Validierung, Wiederholungsmessungen, Befundübermittlung und Meldepflicht Im Rahmen der medizinischen Validierung erfolgt sowohl eine Plausibilitätskontrolle der Einzel-Ergebnisse als auch die Beurteilung der Ergebnisse eines Auftrages in ihrer Gesamtheit im Zusammenhang mit klinischen Angaben über den Patienten. Anschließend wird der Befund entweder elektronisch übermittelt oder als Ausdruck verschickt, was in der Regel, je nach Art der angeforderten Untersuchungen (s. S. 19-20), bereits innerhalb eines Tages nach Probeneingang geschieht. Bei Auftreten eines analytischen Fehlers sowie bei auffälligen Messwerten (wie z.B. positives Ergebnis im CMV-IgM-EIA oder im HBsAg-Test), werden zur Kontrolle des Ergebnisses Wiederholungsbestimmungen durchgeführt. In der Regel wird das Ergebnis zunächst im selben Testsystem (ggf. nach Zentrifugieren der Probe) noch einmal überprüft. 23.07.2018 23
Leistungsspektrum Institut für Virologie Falls nötig, wird zur Kontrolle bzw. Bestätigung des Ergebnisses ein 2. Testsystem oder auch eine andere Untersuchungsmethode herangezogen (z.B. Immunoblot zur Bestätigung eines positiven HIV-ELISA’s). Wiederholungsuntersuchungen aufgrund analytischer Fehler werden auf Kosten des Institutes durchgeführt. Auffällige Ergebnisse (z.B. Influenza--PCR positiv oder HCV-ELISA wiederholt positiv) sowie Befunde mit therapeutischer Konsequenz werden vorab per Telefon mitgeteilt. Positive mikroskopische Befunde (IFT, CMVpp65, ELMI) werden telefonisch sofort nach Durchführung des Tests durchgegeben. Bei positiven Virusisolierungen wird der Einsender umgehend telefonisch informiert. Für einen Befundversand per Fax muss uns eine Datenschutzerklärung des Empfängers vorliegen. (Ein entsprechendes Formular kann auf Wunsch an die uns angegebene Fax- Nr. geschickt werden.) Meldepflichtige Befunde werden an das zuständige Gesundheitsamt, HIV positive Immunoblot-Ergebnisse anonym auf dem entsprechenden Meldebogen ans Robert-Koch-Institut in Berlin gemeldet. Der Nachweis krankenhaushygienisch relevanter Erreger wird der Abteilung Krankenhaushygiene der MHH umgehend telefonisch oder per Fax mitgeteilt. Sollte es Anlass für Reklamationen oder Beschwerden geben, können diese telefonisch oder auch per Email an den Diensthabenden gerichtet werden. 4.4 Vergabe von Unteraufträgen Untersuchungsaufträge, die im Institut für Virologie nicht durchgeführt werden können, werden nach telefonischer Rücksprache an ein anderes akkreditiertes oder an ein entsprechendes Referenz- bzw. Konsiliarlabor oder ein von der GfV als spezialisiert anerkanntes Labor weitergeleitet. Bei speziellen Fragestellungen oder seltenen Ergebnissen (z.B. Hantavirus-IgM positiv) wird Material zur Überprüfung/Bestätigung des Ergebnisses an ein entsprechendes, spezialisiertes Labor versandt. 23.07.2018 24
Leistungsspektrum Institut für Virologie 4.5 Vorgehen bei Verdacht auf eine Infektion mit hochinfektiösen Erregern (Klasse IV-Erreger), z.B. bei V.a. Pocken, Haemorrhagisches Fieber oder andere in den Tropen vorkommende Erkrankungen) Proben mit V.a. Klasse IV-Erreger können in unserem Institut nicht untersucht und daher auch nicht angenommen werden, da Klasse IV Erreger (z.B. Erreger von viralem hämorrhagischem Fieber, s.u.) nur in Instituten mit S-4 Laboratorien untersucht werden dürfen. Bei entsprechendem klinischem Verdacht bitten wir daher, direkt Kontakt mit u.g. S4- Einrichtungen aufzunehmen, dort die Probe anzukündigen und die Modalitäten des Transports zu besprechen. Bei uns eintreffende Proben werden an diese Institutionen weitergeleitet. Bei begründetem klinischen Verdacht auf Pocken oder haemorrhagisches Fieber erfolgt die Untersuchung der Proben im Bernhard-Nocht-Institut, Hamburg, bzw. Im Institut für Virologie, Marburg. Bernhard-Nocht-Institut für Tropenmedizin: Kontakt: Prof. Dr. Horstmann S Bernhard-Nocht-Str. 74 20359 Hamburg Tel.: 040/ 42 81 80 (24-stündige Rufbereitschaft) Email: Labordiagnostik@bni-hamburg.de U Institut für Virologie, Philipps-Universität Marburg Prof. Dr. S. Becker Hans-Meerweinstraße 2 34043 Marburg Tel.: 06421/ 2 86-6254/53 Fax: 06421/ 2 86-6 Email: becker@staff.uni-marburg.de 1TU U1T eickmann@staff.uni-marburg.de 1TU U1T 23.07.2018 25
Leistungsspektrum Institut für Virologie Das Institut für Virologie der MHH bietet eine orientierende Ausschluss-Diagnostik mittels Elektronenmikroskopie bei Pockenverdachtsfällen an (Methode nicht akkreditiert). In diesen Fällen bitte den diensthabenden Assistenten (0176-1532-9555 / MHH intern: 17-9555), U U außerhalb der regulären Dienstzeit: 0176-1532-8889) kontaktieren. U U Ein ähnliches Diagnostikangebot besteht auch im Niedersächsischen Landesgesundheitsamt U U (Tel.: 0511-4505-200). Liste der humanpathogenen viralen Klasse IV Erreger (gemäß GenTR/BioMedR): Dengueviren Gelbfiebervirus Ebolavirus (hämorrhagisches Fieber) Guanaritovirus (Venezuelanisches hämorrhagisches Fieber) Juninvirus (Argentinisches hämorrhagisches Fieber) Krim-Kongo-Fieber Virus (hämorrhagisches Fieber) Lassavirus (hämorrhagisches Fieber) Machupovirus (Bolivianisches hämorrhagisches Fieber) Marburgvirus (hämorrhagisches Fieber) Morbillivirus des Pferdes (Paramyxo-ähnliche Pferdeviren) Pockenviren (Variola-Major- und Variola-Minor-Virus) Rifttal-Fieber-Virus Sabiavirus (Brasilianisches hämorrhagisches Fieber) Südamerikanisches hämorrhagisches Fieber-Virus 23.07.2018 26
Leistungsspektrum Institut für Virologie 5. Untersuchungsprogramm 5.1 Erreger, alphabetisch geordnet Adenoviren Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Virusisolierung Infektion der Atemwege, Augenabstrich, Erfolgreiche Isolierung des Auges, des Rachenabstrich, beweisend für ursächliche Gastrointestinaltraktes Stuhl, Trachealsekret Beteiligung von Adenoviren Antigennachweis: Infektionen des Auges, Augen-, Nachweis beweisend für -direkter IFT der Atemwege Rachenabstrich ursächl. Beteiligung von Adenoviren. (Auge: häufig Serotypen 3, 4, U U 8, 19, 37; Atemtrakt: häufig Serotypen U U 1, 2, 3, 4, 5, 7.) Der Nachweis von Adenoviren im Auge ist U U meldepflichtig! Elektronenmikroskopie Gastroenteritis bei Stuhl Serotypen 31, 40, 41; (Methode nicht akkreditiert) Säuglingen/Kleinkindern nosokomiale Infektionen möglich. (geringe Sensitivität) PCR quantitativ Infektion der Atemwege, Abstriche, BAL, Nachweis von Adenovirus des Auges, des Biopsiematerial, ätiologisch signifikant. Gastrointestinaltraktes und Rachenspülwasser, (Ggf. Rücksprache mit Labor Urogenitaltraktes Stuhl, Urin zwecks Differenzierung von Virus- ausscheidung bei Persistenz) disseminierte Infektionen EDTA-Blut, Hohe Viruslast (>104/ml) in bei immunsupprimierten Serum, P P Blut und Stuhlproben Patienten; diagnostisch wegweisend V. a. Infektion des ZNS Liquor Typisierung Genauere Differenzierung s. PCR Voraussetzung: positive PCR des Virustyps (z.B. zur Risikoabschätzung einer Dissemination) Antikörpernachweis: Verdacht auf Adeno- Serum Pos. IgM weist auf akute IgM, IgG Virusinfektion Infektion hin. Pos. IgG zeigt vorherige Infektion an. (geringe diagnostische Relevanz) Astroviren Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Elektronenmikroskopie Nachweis ätiologisch Gastroenteritis Stuhl (Methode nicht akkreditiert) signifikant BK-Virus Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Verdacht auf Infektion bei Urin, Serum, hohe/ansteigende PCR quantitativ immunsupprimierten Patienten EDTA-Blut Viruslasten signifikant Caliciviren Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Elektronenmikroskopie Gastroenteritis Stuhl Methode nicht akkreditiert 23.07.2018 27
Leistungsspektrum Institut für Virologie Humane Coronaviren Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Gastroenteritis Elektronenmikroskopie Stuhl Methode nicht akkreditiert bei Kleinkindern PCR qualitativ Atemwegsinfektionen BAL, Nasen- Positiver Nachweis deutet unklarer Ätiologie /Rachenabstrich, auf Infektion hin. Rachenspülwasser, Trachealabstrich/-sekret Cytomegalo-Virus (CMV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Virusisolierung Verdacht auf Infektion, BAL, CMV nur bei hoher Reaktivierung bei immun- Urin Virusausscheidung isolierbar → supprimierten Patienten; ätiologisch signifikant kongenitale Infektion Antigen Nachweis: s.o. EDTA-Blut Nachweis von pp65 positiven pp65 Zellen impliziert aktive Virusreplikation PCR quantitativ V.a. Infektion; BAL, Biopsie, Interpretation im Zusammenhang Knochenmark, mit Viruslast in Blutleukozyten (PCR ist sensitiveres Trachealabstrich / oder –plasma. Alternativ-Verfahren zur -sekret; Niedrige Viruslast kann auch pp65-Bestimmung; auch gut geeignet bei durch Latenz bedingt sein – keine Leukopenie) diagnostische Relevanz. Hohe Viruskonzentration in Darmbiopsie weist auf CMV- Enteropathie hin. Therapieüberwachung bei EDTA-Blut; Interpretation in Kenntnis klin. immunsupprimierten Daten (z.B. Therapie); Patienten; Bestimmung der Viruslast im Blut: wichtig für Diagnose einer Reaktivierung. V. a. Infektion des ZNS; Liquor; Positiver Nachweis im Liquor ätiologisch signifikant Virusausscheidung im Urin Urin Positiver Nachweis beweisend für bei Neugeborenen Infektion des Kindes UL97genotypische V. a. Ganciclovir-Resistenz s. PCR Nur Überprüfung der UL97- Resistenzbestimmung Sequenz. Negatives Ergebnis schließt Resistenz nicht aus. Antikörpernachweis: Bestimmung des Serum /Plasma Pos. IgG zeigt vorherige Infektion IgG/IgM Infektionsstatus; an. Pos. IgM kompatibel mit V.a. Primärinfektion oder Primärinfektion/Reaktivierung Reaktivierung Zur kurzzeitigen Überwachung von CMV-Infektionen ist die Serologie ungeeignet. CMV-IgG-Avidität Ist der Ausschluss einer Serum/Plasma Ein positives CMV IgM in Primärinfektion Verbindung mit einer niedrigen erforderlich, sollten CMV- Avidität ist ein starker Indikator IgG reaktive Proben auf für eine CMV-Primärinfektion CMV IgM und CMV IgG- innerhalb der letzten 4 Monate. Avidität getestet werden. Eine hohe Avidität spricht für eine z.B. bei Schwangerschaft länger zurückliegende CMV Infektion. Antikörpernachweis: V. a. Infektion des ZNS Liquor-/ Serum- Erhöhter ASI (intrathekale Ak- ASI paar Synthese) bei chronischer oder zurückliegender ZNS-Infektion 23.07.2018 28
Leistungsspektrum Institut für Virologie Enteroviren (Coxsackieviren, Typ A und B, ECHO-Viren) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Virusisolierung „Sommergrippe“; Stuhl, z.B. Myalgien; Abstriche haemorrhag. Konjunktivitis: U Myocarditis; Bläscheninhalt Coxsackie A Typ 24 Meningitis; Liquor Enterovirus Typ 70 Exantheme; BAL, Hand-Mund-Fuß-Erkrankung: U Hand-Mund-Fuß- Rachenspülwasser, Coxsackie A Typ 16 Erkrankung; Trachealsekret Enterovirus Typ 71 haemorrhagische Meningitis: U Konjunktivitis Coxsackie A Typ 7, Coxsackie B ECHO Viren (z.B. Typ 30) Enteroviren Typ 68-71 PCR qualitativ s.o. Liquor, Stuhl, Versand von EMB am Besten auf Endomyokard- Trockeneis nach Schockgefrieren in Biopsien (EMB), Flüssig N 2 .! R R Abstriche, BAL, Bläscheninhalt, Rachenspülwasser, Trachealsekret Sequenzierung Genauere s. PCR Die Typisierung erfolgt Differenzierung gruppenspezifisch auf des Virustyps bei Speziesniveau. positiver PCR Methode nicht akkreditiert. Epstein-Barr-Virus (EBV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen PCR quantitativ V. a. EBV-Lymphom / EDTA-Blut, Bei V.a. PTLD bitte EDTA-Blut (Viruslast Bestimmung) U U Lymphoproliferation bei (Lymphozyten) einsenden - immunsupprimierten Werte müssen hier im Verlauf Patienten (PTLD); interpretiert werden. V. a. ZNS-Infektion Liquor Positiver Nachweis im Liquor ätiologisch signifikant. Antikörpernachweis: Bestätigung/Ausschluss Serum Frische Infektion: U U EBV IgG/IgM, EBV-IgA einer Mononukleose; EBV IgM IgA + IgG positiv bei EBNA IgG negativem EBNA-IgG und U U EA-D-IgG positivem EA-D-IgG EBV Status vor Abgelaufene Infektion: U U Transplantation; EBV IgM negativ EBV IgG + EBNA IgG positiv V.a. EBV-Reaktivierung Reaktivierung: U U bei immunsupprimierten EBV IgM +IgG (und EA-D-IgG) Patienten positiv und EBNA IgG positiv U Antikörpernachweis: V. a. ZNS-Infektion Liquor-/ Erhöhter ASI (intrathekale Ak- ASI Serumpaar Synthese) bei chronischer oder zurückliegender ZNS-Infektion PCR qualitativ Lymphome bei Biopsie, Interpretation oft schwierig und Immunsuppression; BAL, nur im Zusammenhang mit (auch ZNS Lymphome) Knochenmark, Pathologie aussagekräftig. Trachealabstrich/- EBV im Liquor deutet auf sekret pathologischen Prozess hin. 23.07.2018 29
Leistungsspektrum Institut für Virologie Frühsommer-Meningoencephalitis (FSME) -Virus Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. Infektion; Serum Bei negativem Befund nach IgG/IgM Impfstatus Zeckenbiss-Anamnese Kontrollserum in 2 Wochen untersuchen. Kreuzreaktion mit anderen Flaviviren möglich, z.B. Gelbfieber-Impfung! Hantaviren (Serotypen Hantaan, Puumala) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. Hantavirus-Infektion; Serum Hantavirus kommt in IgG/IgM 'Haemorrhag. Fieber mit Niedersachsen im Raum renalem Syndrom' (HFRS); Osnabrück, Braunschweig, 'Hantavirus Pulmonales Göttingen vor (Reservoir in Syndrom' (HPS) Nagetieren). Hepatitis-A-Virus (HAV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: Bestätigung/ Ausschluss Serum IgG + IgM positiv: IgG/IgM akuter HAV-Infektion; Akute Infektion Überprüfung des Bei Verdacht auf akute U Impfstatus Infektion bitte Meldepflicht U beachten! IgG positiv/ IgM negativ: - Zustand nach Impfung - abgelaufene Infektion mit Immunität - Leihtiter 23.07.2018 30
Leistungsspektrum Institut für Virologie Hepatitis-B-Virus (HBV) Angebotene Methoden Indikation Material Anmerkungen (s.3.1.1) Antigennachweis (ELISA): 18T Bestätigung/ Ausschluss 18T Serum, 18T positiv während der akuten 18T HBsAg 18T einer akuten/ chronischen Plasma 18T Infektion. HBV-Infektion bzw. der Persistiert bei chronischer 18T Infektiosität Infektion HBeAg 18T Nachweis hoher 18T Serum 18T Nachweis hoher Infektiosität, 18T Virämie/Infektiosität positiv während akuter/chron. Infektion bei hoher Viruslast Antikörpernachweis: 18T Bestätigung/ Ausschluss 18T Serum 18T Marker für erfolgte HBV-Infektion 18T anti-HBc IgG 18T einer abgelaufenen Plasma 18T (sowohl ausgeheilt wie chron. Infektion Infektion), falsch positive Ergebnisse 18T möglich anti-HBc IgM 18T Unterscheidung akuter/ 18T Serum 18T Marker der akuten bzw. 18T chronischer Infektion Plasma 18T reaktivierten Infektion (selten) 18T 18T Bei Verdacht auf akute Infektion U U bitte Meldepflicht beachten! anti-HBs 18T Nachweis der Immunität 18T Serum 18T Nachweis der Immunität/ 18T (Impfkontrolle); Plasma 18T Rekonvaleszenz Nachweis abgelaufener, 18T Immunität besteht bei einem Titer 18T ausgeheilter Infektion > 10 U/l Hinweis auf reduzierte anti-HBe Verlauf der Infektion Serum 18T Infektiosität und günstigen 18T 18T 18T Verlauf PCR qualitativ 18T Bestätigung einer HBV- 18T Serum, 18T Positiver Nachweis deutet auf Infektion bei unklarer EDTA-But 18T aktive Infektion hin! U U Serologie Bei Verdacht auf akute Infektion U U bitte Meldepflicht beachten! PCR quantitativ 18T Überwachung der 18T Serum, 18T Viruslast ist Marker für Therapie; Überwachung EDTA-But 18T Infektiosität und für der Infektiosität denTherapieerfolg Hepatitis-C-Virus (HCV) Angebotene Methoden Indikation Material Anmerkungen (s.3.1.1) Antikörpernachweis: Bestätigung/Ausschluss Serum positiver anti HCV „screening“ Test IgG einer HCV-Infektion Plasma ohne HCV-RNA- Nachweis deutet auf U U „inaktive“' Infektion Antigen-Nachweis: Nachweis einer Serum positives Ergebnis deutet auf eine HCV Antigen replikativen / infektiösen Plasma replikative Infektion hin; HCV-Infektion bei klin. V. a. niedrig replikative HCV- Infektion, sollte ein negatives Ergebnis durch PCR aus EDTA Blut überprüft werden. Immunoblot Bestätigungstest Serum positiv, wenn mindestens Plasma 2 Antigene aus unterschiedlichen Genomregionen durch Antikörper der Probe erkannt werden PCR quantitativ Nachweis der Virämie, EDTA-Blut, Positiver Nachweis deutet auf aktive U U Infektiosität Serum Infektion hin! Bei Verdacht auf aktive Infektion bitte U U Meldepflicht beachten! 23.07.2018 31
Leistungsspektrum Institut für Virologie Hepatitis-E-Virus (HEV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: Immunstatus Serum Positiver Nachweis deutet auf IgG Plasma Hepatitis E-Infektion hin; jedoch keine Aussage darüber, ob akute oder abgelaufene Infektion PCR qualitativ, quantitativ Verdacht auf Plasma, Serum, Nachweis einer akuten oder Hepatitis E Infektion Liquor, Urin, Stuhl chronischen Hepatitis E- Infektion (bei Immunsuppression) Hepatitis-D-Virus Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: Immunstatus Serum Nachweis nur bei positivem Nachweis von IgG Anti-HBc möglich (Ko-Infektion)! Positiver Nachweis deutet auf Hepatitis D- Infektion hin; jedoch keine Aussage, ob akute oder abgelaufene Infektion Humanes Herpesvirus 6 (HHV-6) Angebotene Methoden Indikation Material Anmerkungen (s.3.1.1) Antikörpernachweis: Verdacht auf HHV6- Infektion/ Serum IgM-Nachweis oft unsicher IgG/IgM Reaktivierung; Exanthema subitum PCR qualitativ V. a. ZNS-Infektion Liquor Positiver Nachweis Knochenmark ätiologisch signifikant PCR quantitativ Immunsupprimierte Patienten mit EDTA-Blut erhöhte HHV 6-Last bei Fieber, Biopsie Immunsupprimierten als Panzytopenie; Differentialdiagnose Ursache für Symptome, wie zu CMV-bedingten Erkrankungen bei sie auch bei einer CMV- Immunsupprimierten Erkrankung auftreten Humanes Herpesvirus 8 (HHV-8) / Kaposi-Sarkom-assoziiertes Herpesvirus (KSHV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. HHV 8-Infektion Serum AK gegen das „Latente (indirekter IFT) Nukleäre Antigen“ (LANA) LANA IgG finden sich bei ca. 80% aller infizierten Individuen PCR qualitativ V. a. Kaposi Sarcoma (KS), Biopsie, Primary Efffusion Lymphom Knochenmark (PEL), Multicentric Castleman’s disease (MCS) PCR quantitativ Überwachung EDTA Blut, erhöhte Viruslast korreliert mit immunsupprimierter HHV 8- Biopsien, Rachen- Tumorentstehung infizierter Personen mit spülwasser erhöhtem Risiko für KS/ PEL/ MCS 23.07.2018 32
Leistungsspektrum Institut für Virologie Herpes-simplex-Virus, Typ 1 und 2 (HSV-1/-2) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. HSV-Infektion oder Serum bei Primärinfektion und IgG/IgM -Reaktivierung Reaktivierung IgG und IgM positiv Antikörpernachweis: V. a. ZNS-Infektion Liquor-/ Erhöhter ASI (intrathekale Ak- ASI Serumpaar Synthese) bei chronischer oder zurückliegender ZNS-Infektion Antigennachweis: V.a. HSV-Infektion oder Augenabstrich, direkter Erregernachweis: direkter IFT Reaktivierung; Schleimhaut-und Nachweis HSV-infizierter HSV-verdächtige andere Abstriche, Zellen Bläschen; Bläscheninhalt, Gingivostomatitis; Rachenspül- wasser, BAL, Trachealsekret V.a. disseminierte Infektion bei immunsupprimierten Patienten Virusisolierung V. a. auf HSV-Infektion s.o. Isolierung meist innerhalb von (s.o.) 2-3 Tagen positiv Elektronenmikroskopie HSV-verdächtige Bläschen Bläscheninhalt direkter Erregernachweis; (Methode nicht akkreditiert) kann Ursache der Bläschen auf 'Virus der Herpesgruppe' einengen. Keine Differenzierung HSV / VZV möglich, aber Abgrenzung von anderen Viren (Entero-, Pox-Viren) Resistenzbestimmung V. a. Therapieresistenz Bläscheninhalt, aufwendig, setzt erfolgreiche (Acyclovir) Liquor, Virusisolierung voraus. Rachenabstrich Nur nach Rücksprache! U PCR qualitativ HSV-verdächtige Abstriche, Positiver Nachweis deutet auf Bläschen, BAL, aktive Infektion hin. Bläscheninhalt, Trachealsekret PCR quantitativ V.a. disseminierte Infektion EDTA-Blut, Positiver Nachweis im Blut ist bei immunsupprimierten Plasma beweisend für generalisierte Patienten HSV-Infektion. V.a. Meningoencephalitis Liquor Positiver Nachweis im Liquor deutet auf HSV- Meningitis/Encephalitis. 23.07.2018 33
Leistungsspektrum Institut für Virologie Humanes Immundefizienz-Virus, Typ 1 und 2 (HIV-1/-2) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. HIV-Infektion Serum HIV-1.2.0 „screening“ Test, IgG Plasma positives Ergebnis allein nicht beweisend für HIV-Infektion! Bestätigungstest (Immunoblot) erforderlich. (z. Zt. wird auch ein Elisa durchgeführt, der neben HIV-Ak HIV-Antigen nachweisen kann) Antikörpernachweis: Bestätigung eines pos. Serum positiv, wenn mindestens 2 virale HIV-Immunoblot ELISA-Ergebnisses; Plasma Strukturproteine, darunter Diskriminierung HIV-1, 2 mindestens ein Hüllglykoprotein (gp160, gp120, gp41) von Ak in der Probe erkannt werden. Bei Verwendung von Blots, in welchen HIV-1 und HIV-2 Proteine aufgetragen sind, ist die Diskriminierung zwischen HIV-1 und HIV-2 möglich. PCR qualitativ Unklare serologische EDTA-Blut Bestätigung der Diagnose in der Befunde Frühphase der Infektion PCR quantitativ Bestimmung d. Viruslast; EDTA-Blut, Viruslast ist Marker für den Therapieüberwachung; Therapieerfolg V.a. HIV- Liquor Positiver Nachweis im Liquor Encephalopathie ätiologisch signifikant. (Humanes) Metapneumovirus (HMPV oder MPV) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen PCR qualitativ Verdacht auf Infektion BAL, falls nicht verfügbar, Positiver Nachweis mit Metapneumoviren. andere resp. Materialien wie: deutet auf Infektion Atemwegsinfektionen Nasen-/ Rachenabstrich, hin. unklarer Ätiologie Rachenspülwasser, Nasopharyngealsekret, Trachealabstrich/-sekret Direkter IFT Verdacht auf Infektion BAL, falls nicht verfügbar, Positiver Nachweis mit humanen andere resp. Materialien wie: deutet auf Infektion Metapneumoviren. Nasen-/ Rachenabstrich, hin. Atemwegsinfektion Rachenspülwasser, unklarer Ätiologie Nasopharyngealsekret, Trachealabstrich/-sekret 23.07.2018 34
Leistungsspektrum Institut für Virologie Humanes T-Zell-Leukämie-Virus, Typ 1 und 2 (HTLV-1/-2) Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antikörpernachweis: V. a. HTLV-Infektion; Serum HTLV-1 selten in Westeuropa, Immunoblot V. a. adulte T-Zell- häufiger in Afrika, Japan, Leukämie; Karibik; V. a. tropische spastische HLTV-2 häufiger bei i. v. Paraparese Drogenabhängigen Influenzaviren, Typ A und B Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen Antigennachweis: V. a. Influenza- BAL, Augenabstrich, Nasen- Influenza-Antigennachweis Direkter IFT, Infektion /Rachen-abstrich, Rachen- bei passender Ag-Schnelltest spülwasser, Naso- Symptomatik ätiologisch pharyngealsekret, signifikant Trachealabstrich/-sekret Virusisolierung V. a. Influenza- BAL, Augenabstrich, Nasen- Virusisolierung beweisend Infektion /Rachen-abstrich, Rachen- für Influenzavirus-Infektion spülwasser, Naso- pharyngealsekret, Trachealabstrich/-sekret PCR qualitativ V. a. Influenza- BAL, Augenabstrich, Nasen- Bestätigung der Diagnose Infektion /Rachen-abstrich, Rachen- in der Frühphase der spülwasser, Naso- Infektion pharyngealsekret, Eine Differenzierung in die Trachealabstrich/ -Sekret Subtypen ist möglich. JC Virus Angebotene Methoden Indikation Material (s.3.1.1) Anmerkungen PCR V.a. PML bei Liquor PositiverNachweis von immunsupprimierten und HIV JCV DNA in Liquor positiven Patienten cerebrospinalis deutet auf PML hin. 23.07.2018 35
Sie können auch lesen