Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin

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Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Arbeitsbereich Zellbiologie

  Arbeitsbereich Zellbiologie   Universitätsmedizin
                                Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Vorlesungs-/Seminartermine
             WS Master Med. Biotechnol. 2020/21
             Start: 02.11.2020         Ende: 29.01.2021
Datum                       Vorlesungsthema                                         Referentin

                            Einführung V/S/P Zell-Material-Interaktion, Belehrung
                                                                                    Dr. Stählke, Dr. Rebl,
04.11.2020                  Biomaterialien
                                                                                    PD Dr. Kirsten Peters

11.11.2020                  Geweberegeneration                                      PD Dr. Kirsten Peters

18.11.2020                  Nanobiotechnologie                                      PD Dr. Kirsten Peters

                            Drug Release: Einsatz von Nanopartikeln in der                                            PD Dr. Kirsten Peters
25.11.2020                                                                          Dr. Henrike Rebl
                            Medizin

02.12.2020                  Zellphysiologie und Biomaterialmodifikation             Prof. Dr. Barbara Nebe

09.12.2020                  Bioaktive Wirkstoffe und Zellaktivität                  Prof. Dr. Barbara Nebe

16.12.2020                  Zelladhäsion und Zytoskelett                            Prof. Dr. Barbara Nebe

                                                                                    Dr. Stählke, Dr. Rebl,
06.01.2021                  Seminar zum Praktikum
                                                                                    PD Dr. Kirsten Peters
                                                                                                                      Prof. Dr. Barbara Nebe
13.01.2021                  Seminar                                                 PD Dr. Kirsten Peters

20.01.2021                  Zellsignaling (wnt, Ca2+)                               Dr. Susanne Stählke

27.01.2021                  Seminar final (Prüfungsvorbereitung                     Prof. Dr. Barbara Nebe

10.02.2021                  Klausur Biomaterialien 10.00 Uhr

        Arbeitsbereich Zellbiologie                                                                          Universitätsmedizin
                                                                                                             Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Vorlesungs-/Seminar & Praktikum
WS Master Med. Biotechnol. 2020/21

 Interne Anwesenheitsliste

 PDF-Dateien / Skripte & Protokolle auf der Homepage des
  Arbeitsbereiches Zellbiologie https://zellbiologie.med.uni-rostock.de

 Passwort: Zellbio_MBT20

Arbeitsbereich Zellbiologie                                Universitätsmedizin
                                                           Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)
  WS Master Med. Biotechnol. 2020/21

  Dienstags: 8.30 – 10.00 Uhr, 10.00 – 15.00 Uhr

                                                                              Dr. S. Stählke, Dr. C.
 24. 11. 2020                          Versuchstag 1 (8.30 -15.00 Uhr)    Bergemann, Dr. H. Rebl, PD
                                                                           Dr. K. Peters, Frau Seidel
 01. 12. 2020                                  Versuchstag 2                           s.o.
 08. 12. 2020                                  Versuchstag 3                         s.o.
 15. 12. 2020                                  Versuchstag 4                         s.o.

Arbeitsbereich Zellbiologie                                              Universitätsmedizin
                                                                         Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)
    WS Master Med. Biotechnol. 2020/21
Mittwoch        Mittwoch                                                                                                    Mittwoch
4.11.2020       18.11.2020      Dienstag 24.11.2020 Dienstag 1.12.2020       Dienstag 8.12.2020    Dienstag 15.12.2020 6.1.2021
                                8.30-10.00 Kurssaal   8.30-10.00 Kurssaal    8.30-10.00 Kurssaal   8.30-10.00 Kurssaal
                                Einführung            Biomaterial Handling   Pipettieren,          ImageJ, Auswertung +
                                Analysenwaage,                               Herstellen der        Protokollierung
                                Berechnen der                                Collagen-Lösung und
                                Verdünnungen,                                Beschichtung der
                                Einwiegen und                                wells
                                Herstellen der
                                Polyhema-Lösung
                                                                     Raumwechsel
10.15 MKG       10.15 MKG                                                                                                   10.15 MKG
Hörsaal         Hörsaal       10.00-15.00 AB Zellbio 10.00-15.00 AB Zellbio 10.00-15.00 AB Zellbio 10.00-15.00 AB Zellbio   Hörsaal
Vorstellung     Arbeits- und
Praktikum +     Brandschutz,
Ausgabe der     Vorstellung
Fragebögen      der Techniken
                              LSM                    LSM                    FACS                   FACS
                für die
                einzelnen
                Stationen,                                                                                                  Vorträge aller
                4x15min                                                                                                     Gruppen

Abgabe der                      Zellkultur            Zellkultur             NC3000                NC3000
Fragebögen
am 11.11.2020

  Arbeitsbereich Zellbiologie                                                                          Universitätsmedizin
                                                                                                       Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)
 Aufteilung in 4 Gruppen (á 3-4 Studenten)
                                                                      Dienstag 15.12.2020
                                                                      8.30-10.00 Kurssaal
 Link zu Protokollen (ausdrucken und mitbringen)                     ImageJ, Auswertung +
                                                                      Protokollierung

 Vergabe von internen Laborkitteln und Schuhüberziehern

 Pro Gruppe USB und Laptop (am 15.12.2020) wird benötigt

   Am Ende (06.01.2021) Ergebnisvorstellung in Form eines Kurzvortrages (jede Gruppe)

   Praktikum ist relevant für die Prüfung Biomaterialien

   Belehrung beachten (Protokoll und vor Ort)
   Wertsachen (eigene Verantwortung)

       Arbeitsbereich Zellbiologie                                    Universitätsmedizin
                                                                      Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)
           Untersuchung des zellbiologischen Verhaltens von MG-63 Zellen (Knochen-Zelllinie) auf
            unterschiedlich beschichteten Oberflächen vergleichend zur unbehandelten Kontrolle

                                            Ausgangsmaterial: Poly-HEMA, Kollagen & Kontrolle
                                                     Zellen: MG-63 Osteoblasten

Laser-Scanning                       Zellkultur:                          Quantitative                Durchfluss-
Mikroskopie:                         •    Kultivierung                    Mikroskopie:                zytometrie:
•   Live cell Imaging                     verschiedene Zellen             •    Zellzählung            •   Expression von
•   Expression von                        (SaOS, MG-63, hASC)             •    Zellzyklusanalyse          Adhäsionsrezeptoren
    Adhäsionsrezeptoren              •    Mikroskopie                                                 •   Zellzyklusanalyse
•   Aktinzytoskelett                      Morphologie                                                     (FlowJo)
                                     •    Zellzählung
                                     •    ALP Aktivität

Dr. Henrike Rebl                         Ing. Petra Seidel,                       Dr. Claudia         Dr. Susanne Stählke
                                         Dipl. -Hum. Biol.                        Bergemann
                                            Olga Hahn

       Arbeitsbereich Zellbiologie                                                                 Universitätsmedizin
                                                                                                   Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)
 WS Master Med. Biotechnol. 2019/20

Ausgabe der Fragebögen

 Vorkenntnisse

 Impfschutz

 Gruppeneinordnung

 Zurück am 11.11.2020

                                      Universitätsmedizin
                                      Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Praktikum Zell-Material-Interaktion (30023)

Ausgabe der Protokolle für das Praktikum über
Homepage des Arbeitsbereichs Zellbiologie (ab
12.11.2020)

 Grobe Beschreibung der entsprechenden
  Versuche, Auflistung wichtiger Substanzen (mit
  Hinweis auf Gefahren)
 Links zu wichtigen Reagenzien wie Antikörper

 Protokolle vorab durcharbeiten!

 Detaillierter Versuchsablauf der jeweiligen
  Gruppe soll dann selbstständig erarbeitet und
  protokolliert werden

   Arbeitsbereich Zellbiologie                     Universitätsmedizin
                                                   Rostock
Arbeitsbereich Zellbiologie - Universitätsmedizin
Was erwartet euch?
Praktikum Zell-Material-Interaktion

•    Was ist Forschung? Was macht einen richtigen Forscher aus?

•    Versuchsaufbau
     o Theorie
     o Design
     o Methoden
     o Durchführung / Fehleranalyse

•    Versuchsauswertung
     o Computergestützte Analyse (Software)
     o Statistik

•    Veröffentlichung

    Arbeitsbereich Zellbiologie                            Universitätsmedizin
                                                           Rostock
Was ist Forschung?
• Unter Forschung versteht man, im Gegensatz zum
  zufälligen Entdecken, die systematische Suche
  nach neuen Erkenntnissen sowie deren
  Dokumentation und Veröffentlichung

• Die Publikation erfolgt überwiegend als
  wissenschaftliche Arbeit in relevanten
  Fachzeitschriften und/oder über die Präsentation bei
  Fachtagungen                                           www.hm.edu

• Forschung und Forschungsprojekte im
  wissenschaftlichen Rahmen:
   o Grundlagenforschung
   o Angewandte Forschung

                                                                          Wikipedia.org

                                                         Universitätsmedizin
                                                         Rostock
Versuchsaufbau

• Fragestellung/Thema:

Untersuchung des zellbiologischen Verhaltens von
MG-63 Zellen (Knochen-Zelllinie) auf unterschiedlich
beschichteten Oberflächen vergleichend zur
unbehandelten Kontrolle

                                                       Universitätsmedizin
                                                       Rostock
Versuchsaufbau - Theorie

• Hypothese formulieren – Literaturrecherche!

 Welche Informationen sind bekannt? (Stand der
  Forschung)

 Welche Methoden/Experimente sind relevant
  und sinnvoll?

                                                   Fachhochschule Düsseldorf –
                                                   University of Applied Sciences
                                                   (SlidePlayer.org)

                                                  Universitätsmedizin
                                                  Rostock
Versuchsdesign

 Thema: Untersuchung des zellbiologischen Verhaltens von MG-63 Zellen
 (Knochen-Zelllinie) auf unterschiedlich beschichteten Oberflächen
 Resultiert die Behandlung einer Probe mit „X“ in ein verändertes
  Zellverhalten im Vergleich mit einer unbehandelten Probe?

    Zelleinsaat auf                                       Zelleinsaat auf
    Kulturschale                                          Goldstandard
    (Polystyrol), Glas                                    /Positivkontrollen
    oder Metall

                                                            Universitätsmedizin
                                                            Rostock
Methoden Potpourri
    – Versuchsplanung & Durchführung
                              Untersuchung des zellbiologischen
                                Verhaltens von MG-63 Zellen
                            (Knochen-Zelllinie) auf unterschiedlich
                                 beschichteten Oberflächen

Quantitative            Zellkultur:                Laser-Scanning             Durchfluss-
Mikroskopie:            •    Kultivierung          Mikroskopie:               zytometrie:
•   Zellzählung              verschiedene Zellen   •   Live cell Imaging      •   Expression von
•   Zellzyklusanalyse        (SaOS, MG-63,         •   Expression von             Adhäsions-
                             hASC)                     Adhäsions-                 rezeptoren
                        •    Lichtmikroskopie          rezeptoren             •   Zellzyklusanalyse
                             Morphologie           •   Aktinzytoskelett            (FlowJo)
                        •    Zellzählung
                        •    ALP Aktivität

                                                                           Universitätsmedizin
                                                                           Rostock
Versuchsdurchführung / Fehleranalyse

 Wie kann ich meine Hypothese beweisen?

 Bei Experimenten ist es wichtig genau zu protokollieren

• Untersuchungsbedingungen konstant gehalten – gleiches Design?

• Jedes Experiment bestand aus Kontrollansatz (alle Faktoren konstant/bekannt
  [TCPS]) und einem oder mehreren Testansätzen (Faktoren werden gezielt
  verändert [Poly-HEMA/Kollagen])

• Methoden waren sinnvoll bzw. müssen angepasst/optimiert werden

• Experimente wurden wiederholt  Wiederholung sollten (nahezu) gleiche
  Ergebnisse liefern

                                                            Universitätsmedizin
                                                            Rostock
Versuchsauswertung & Statistik

Computergestützte Analyse (Software)

                                       • Das Ziel der reinen mathematischen
                                         Statistik ist das Beweisen
                                         allgemeingültiger Aussagen mit den
                                         Methoden der reinen Mathematik

                                       • Zusammenfassung bestimmter
                                         Methoden zur Analyse empirischer
                                         Daten

                                                        Universitätsmedizin
                                                        Rostock
Veröffentlichung der Daten

 Poster Präsentation

 Vortrag

 Publikation

                             Universitätsmedizin
                             Rostock
Forschung

            Universitätsmedizin
            Rostock
Vorlesungsankündigungen
 Moderne Messmethoden in der medizinischen Grundlagenforschung

 Zeit: 13:00 – 15:00 Uhr
 Ort: Seminarraum 10, BMFZ, Schillingallee 69

 1.   Die Densitometrie – Western Blot (03.11.2020)
 2.   Die Durchflusszytometrie (10.11.2020)
 3.   Die Konfokale Laser Scanning Mikroskopie (17.11.2020)

                           Interesse? Anmeldung per Mail:
                       susanne.staehlke@med.uni-rostock.de
 Referentin: Dr. Susanne Stählke                             Universitätsmedizin
                                                             Rostock
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