Spurensuche - Nachweis versteckter Allergene - Das Unsichtbare sichtbar machen mittels Reveal 3-D Allergen Testen
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Dr. rer. nat. Rolf Steinmüller Spurensuche – Nachweis versteckter Allergene Das Unsichtbare sichtbar machen mittels Reveal® 3-D Allergen Testen Das Thema Lebensmittelall- Aus diesem Grunde standen ent- Nüsse dennoch geringe Nussspu- ranten (Auditierung), den Einsatz ergie und das Vorhandensein sprechende Nachweisverfahren lan- renanteile enthalten. Was nicht von zertifizierten Rohstoffen, die von Allergenen in Lebensmit- ge Zeit im Focus der Lebensmittel- nach viel klingt kann für Allergi- Benutzung von separaten und sau- teln haben aktuell vermehrt analytik. Aber manchmal ist es das ker schwerwiegende Folgen ha- beren Transportbehältnissen, die an Aufmerksamkeit und Bri- Nahrungsmittel selbst, oder dessen ben. Ihr Immunsystem wehrt sich räumliche Trennung der Produkti- sanz gewonnen. Auch wenn Bestandteile, das den Verbraucher gegen an sich harmlose Substan- onslinien sowie auch die Durchfüh- nicht alles was kribbelt und gefährdet. Lebensmittelallergien sind zen wie Proteine, und zwar schon rung adäquater Reinigungsschritte. kratzt gleich eine Allergie ist. auf dem Vormarsch – vornehmlich bei winzigen Mengen. Die Reak- Nach jeder Produktion bzw. Produk- Wer aber allergisch auf be- in der öffentlichen Wahrnehmung. tionen reichen dabei von Juckreiz tionsfolge von allergenhaltigen Pro- stimmte Lebensmittel reagiert, Einigkeit besteht jedoch darin, dass und Hautrötungen bis zum zuwei- dukten muss eine angemessene Rei- kommt nicht umhin, die ent- die einzige Möglichkeit für einen len tödlichen Atem- oder Kreislauf- nigung durchgeführt werden, um sprechenden Produkte zu mei- Allergiker in der Vermeidung aller stillstand. eine Deklaration des Endproduktes den. Durch die Änderung in der Nahrungsmittel liegt, die Spuren mit dem Hinweis auf mögliche Al- EU-Gesetzgebung und Anfor- der Allergie auslösenden Lebens- Allergenmanagement lergene zu vermeiden. derungen internationaler Stan- mittel enthalten können. dards sehen sich Lebensmittel- Generell gelangen Allergene unver- Hygiene- oder Reinigungskontrolle produzenten vor völlig neue Folgerichtig werden potente analy- meidbar oder unbeabsichtigt wäh- vor und nach Reinigungsvorgängen Aufgaben gestellt: Die rich- tische Methoden benötigt, um die rend des Herstellungsprozesses an- gehören zu den zwingend notwen- tige Produktkennzeichnung oft nur in Spuren vorkommenden lagenbedingt oder aber handlungs- digen Maßnahmen in der Be- und zu gewährleisten und Kreuz- versteckten Proteine mit allergenem bedingt in das Lebensmittel. Dabei Verarbeitung von Lebensmitteln. kontaminationen im Produk- Potential in Lebensmitteln sicher und hängt die Gefahr, dass ein Lebens- Durch derartige Maßnahmen wird tionsprozess sicher zu erken- zuverlässig nachweisen zu können. mittel versteckte Allergene enthal- nicht nur die Gefahr der Rückstands- nen, ist zwingender Bestand- Gefragt sind namentlich schnelle ten kann, erheblich von der Art Verschleppung von Keimen (Patho- teil der Qualitätssicherung und und leicht handhabbare diagnos- des Produktes und dem Herstel- gen-Problematik), Bakterien-Toxi- Produkthaftung. tische Teste, um Kontaminationen zu lungsprozess ab. In vielen Fällen nen, Produktresten (Verfälschung) vermeiden und Lebensmittel ohne könnten Hersteller bei einem ent- und anderen unerwünschten Sub- Vor dem Hintergrund, dass großen Laboraufwand zu testen. sprechenden Allergenmanagement stanzen in nachfolgenden Produkt- versteckte, nicht deklarierte erheblich geringere Kontaminations- Chargen reduziert, sondern auch Inhaltsstoffe in Lebensmitteln Allergikertaugliche mengen zusichern oder sogar den der Eintrag von Allergen-haltigen für Allergiker ein großes ge- Lebensmittel Idealfall „frei von“ erreichen. Un- Bestandteilen. Für verantwortungs- sundheitliches Problem dar- absichtliche Kontaminationen müs- bewusste Produzenten ist die Inte- stellen, zielt ein Allergenma- „Kann Spuren von Nüssen enthal- sen durch entsprechende Maßnah- gration der Allergenproblematik nagement auf die Verringe- ten“ dieser oder ähnliche Warn- men ausgeschlossen werden. Mit innerhalb von HACCP-Konzepten rung unbeabsichtigter ver- hinweise auf Lebensmittelverpa- Hilfe entsprechender Lebensmittel- aufgrund der hohen Brisanz un- steckter Inhaltsstoffe durch ckungen werden all zu oft inflati- managementsysteme können Be- abdingbar. Die übliche industriel- eine Verbesserung der Abläufe. onär benutzt. Schränken derartige triebe den Schutz von Leben und le Reinigungspraxis ist allzu häufig Dies beinhaltet eine Überwa- pauschale Hinweise doch Allergi- Gesundheit zum Gegenstand der nicht effizient genug, um empfind- chung der Ausgangsmateria- ker unnötig ein und beeinträchti- Unternehmenspolitik und damit liche Allergiker zu schützen. lien, eine Überwachung der gen in einem nicht unerheblichen zum konkreten Gestaltungs- und Herstellungsprozesse sowie Maße deren Lebensqualität. Entwicklungsziel ihrer Organisati- Letztlich bleibt als Maßnahme, um die Überprüfung der Reini- on machen. eine Verunreinigung mit allergenen gungseffizienz. Nichtsdestoweniger stellt die Herstel- Bestandteilen auszuschließen oder lung allergietauglicher Lebensmittel Verringerung des doch zumindest zu minimieren bzw. Einleitung die Unternehmen häufig vor große Kontaminationsrisikos zu überwachen, nur die Prüfung auf Probleme. Vornehmlich kleinere Fir- derartige Bestandteile. Eine umfas- Pestizidrückstände, Gifte und Keime men stellen unterschiedlichste Pro- Maßnahmen zur Verringerung des sende Qualitätssicherung in der werden allzu oft mit Gesundheits- dukte auf ihren Produktionsanlagen Kontaminationsrisikos beinhalten ne- Lebensmittelindustrie, aber auch schäden in Verbindung gebracht, her. Aus diesem Grund kann bei- ben der Prüfung von Herstellungs- im Rahmen der allgemeinen Pro- wenn es um unsere Ernährung geht. spielsweise die Schokolade ohne methoden bei den Rohstoffliefe- dukthaftung, bedingt daher Ver- 4
fahren, mit denen versteckte Aller- Testverfahren Enzymimmunoassay (ELISA) unter gen Verwandten zu differenzieren. gene in Lebensmitteln und in Um- den immunchemischen Methoden Beispielsweise umfasst die Familie weltproben zuverlässig und präzise Wie kann die Lebensmittelindus- und zur sequenzspezifischen Nu- der Apiaceen sowohl die allergene identifiziert und quantifiziert wer- trie konkret sowohl die Einhaltung kleinsäureamplifikationstechnik in Spezies Sellerie als auch nicht al- den können. der neuen Kennzeichnungspflicht Echtzeit (real-time PCR) unter den lergene Spezies wie Petersilie oder als auch ungewollte Einträge all- molekularbiologischen Techniken. Kümmel. Ebenfalls eng verwandt Spurenanalytik – Allergen- ergieauslösender Lebensmittelbe- sind die beiden kennzeichnungs- Detektion in Lebensmitteln standteile während der Produkti- Neben dem Enzymimmunoassay pflichtigen Schalenfrüchte Walnuss on überprüfen? (z. B. ELISA) und der Polymerase- und Pekannuss, die es analytisch zu Die Notwendigkeit, allergene Zu- Kettenreaktion (PCR) wurden alter- unterscheiden gilt. taten in Lebensmitteln nachzuwei- In den letzten Jahren wurde eine native Methoden, wie etwa Biosen- sen, ergibt sich daraus, dass sie eine Vielzahl von Testverfahren zum soren oder massenspektrometrische Überdies ist zu berücksichtigen, dass nicht zu unterschätzende Gefahr für Nachweis von allergenen Lebens- Verfahren entwickelt. Ihr Entwick- es sich bei den zu untersuchenden allergische Konsumenten darstellen mitteln entwickelt. Unter der Viel- lungsstand und Praktikabilität liegt Lebensmitteln um Naturprodukte und die Nachweisbarkeit die Vo- zahl möglicher Nachweisverfahren jedoch deutlich hinter den ELISA- mit natürlich bedingten und verar- raussetzung dafür ist, diese Konsu- für allergene Lebensmittelbestand- oder PCR-Anwendungen. beitungsbedingten Schwankungen menten davor warnen und schützen teile haben sich für routinemäßige in der Zusammensetzung handelt. zu können. Darüber hinaus kann im Nahrungsmittelprüfung immunolo- Test-Anforderungen Ein wesentliches Kriterium für die Rahmen der Lebensmittelüberwa- gische und molekularbiologische Beurteilung derartiger Tests ist die chung nur durch geeignete Nach- Analysentechniken als die Metho- Unabhängig von der eingesetzten Sensitivität. Schließlich vermögen weismethoden die gesetzlich fest- den der Wahl erwiesen. Dabei ba- Methode sollten die Nachweisver- bereits kleinste Mengen eines Al- gelegte Kennzeichnung allergener sieren die immunologischen Verfah- fahren in erster Linie spezifisch für lergens allergische Reaktionen aus- Nahrungsmittelbestandteile über- ren auf dem Nachweis von spezi- das gesuchte Lebensmittel sein. zulösen. Da diese bereits bei weni- prüft werden. Ferner ist auch der fischen Proteinen und die moleku- Schließlich gilt die unglaubliche gen ppm liegen können, sind Nach- Nachweis unbeabsichtigter Einträ- larbiologischen Methoden auf der Vielfalt der Lebensmittelallergene weisgrenzen in diesen Bereich not- ge in der Lebensmittelproduktion Detektion von charakteristischen Nu- als eine der größten Herausforde- wendig. für den Produzenten von besonde- kleinsäuresequenzen. In den aller- rungen für die Analytiker. Die Vielfalt rem Interesse. Aus diesem Grunde meisten Fällen wird nicht das aus- der Allergene ergibt sich nicht nur, Lebensmittel stellen darüber hinaus begrenzt sich die Allergenanalytik lösende allergene Protein oder die weil so viele einzelne Lebensmittel ein wahres Sammelsurium an un- nicht nur auf aufwendige Labor- kodierende Nukleinsäure detektiert, entsprechende Inhaltsstoffe aufwei- terschiedlichen Substanzen dar und methoden, sondern umfasst auch sondern ein für das jeweilige Nah- sen, sondern auch, weil ein Lebens- setzen sich, besonders im Falle ver- so genannte „Schnelltests“, die ein- rungsmittel charakteristisches Pro- mittel mehrere Allergene aufweisen arbeiteter Lebensmittel, aus einer fach in der Handhabung sind und tein bzw. dessen kodierende Nukle- kann. Zusätzlich müssen derartige Vielzahl unterschiedlichster Zutaten ein breites Anwendungsspektrum insäure. Gegenwärtig besteht ein Nachweismethoden in der Lage zusammen. Daher sollten derartige aufweisen. klarer Trend hin zum Festphasen- sein zwischen phylogenetisch en- Tests in allen relevanten Matrices, Abb. 1: Testprinzip der Veratox® Allergen ELISA Teste. Bei den Veratox®-Allergen Testen handelt es sich um Sandwich-ELISAs, bei welchen die Vertiefungen der Mikrotiterstreifen mit spezifischen Fänger-Antikörpern gegen das gesuchte Protein beschichtet sind. Die in der Probe bzw. im Standard enthaltenen Antigene binden sich während der 10minütigen Inkubation an die gebundenen Antikörper. Alle nicht gebundenen Bestandteile werden durch sorgfältiges Waschen entfernt. Anschließend werden mit Peroxidase (HRP) konjugierte Antikörper (zweiter Anti- körper bzw. Detektions-Antikörper) hinzugegeben, die sich an die gebundenen Antigene anlagern. Nach einer weiteren Inkubation von 10 Minuten wird im anschließenden Waschvorgang überschüssiges Konjugat entfernt. Durch Zugabe des Substrats (TMB) entsteht eine blaue Farbreaktion, deren Intensität proportional zur Toxinmenge ist, d.h. je stärker die Färbung, desto höher ist die Konzentration des gesuchten Antigens. Die Auswertung erfolgt nach Zugabe der Stopplösung mit Hilfe eines Mikrostreifen-Fotometers bei einer Wellenlänge von 650nm. Der tatsächliche Gehalt der Probe ergibt sich direkt aus der Standardkurve. Der Test lässt sich jedoch alternativ auch qualitativ durchführen. Die Auswertung kann in diesem Falle visuell erfolgen. 1 2011 5
in denen das gesuchte allergene ELISA Der sogenannte Fängerantikörper von Produktionsanlagen nach er- Lebensmittel versteckt vorhanden wird auf der Festphase gebunden folgter Reinigung. Diese Tests er- sein könnte, anwendbar sein. Zu- Aufgrund der einfachen Handha- und „fängt“ den Analyten aus der möglichen eine laborunabhängige sätzlich sollten auch für thermisch bung und der Möglichkeit, in re- Probe. Der enzymmarkierte De- Aussage über den Allergengehalt oder auf andere Weise verarbeite- lativ kurzer Zeit viele Proben paral- tektionsantikörper bindet sich an- über einem bestimmten Schwel- te Bestandteile, beispielsweise für lel unter zeitgleichen Bedingungen schließend an den gebundenen lenwert und können somit eine rohe und geröstete Nüsse, die er- und mit relativ geringen Mengen Analyten. Je mehr Analyt gebun- ideale Anwendung in der Überprü- forderlichen Spezifitäten und Sen- an Verbrauchsmitteln analysieren zu den wird, umso mehr Detektions- fung einer Kontamination mit All- sitivitäten erzielt werden. können, einhergehend mit einem antikörper und somit Enzym wird ergenen finden. Derartige Verfah- hohen Automatisierungspotenzi- gebunden, wodurch das Signal di- ren werden in erster Linie als qua- Weitere Anforderungen an Nach- al, haben sich ELISA-Verfahren in rekt proportional zur Analytkonzen- litative Teste eingesetzt. weismethoden für Allergene sind der Praxis durchgesetzt. Im ELI- tration in der zu messenden Probe deren Robustheit, Routinefähigkeit SA, dem enzymgekoppelten Im- ist (s. Abbildung 1). Die technologische Basis für die und kurze Testdauer. Doch auch munadsorptionstest, wird die di- Entwicklung von immunlogischen wirtschaftliche und ökonomische rekte Bindung von Analyt (so ge- Die NEOGEN Allergenkits Alert® und Lateral-Flow Assays wurde im Jah- Aspekte stehen im Focus, denn sie nanntes Antigen, im konkreten Fall Veratox® (Casein, Ei, Erdnuss, Ge- re 1980 durch die Entwicklung von garantieren die Bewältigung eines das gesuchte Lebensmittelallergen) samt-Milch, Gliadin, Haselnuss, Man- kolloidalen Partikeln zur Markierung hohen Probendurchsatzes. Aus den und Antikörper nachgewiesen. Das del, Senf & Soja) werden in enger gegründet. Die erste und gleichzei- genannten Gründen werden in den Prinzip beruht dabei auf der Bin- Kooperation mit einem der führen- tig eine der populärsten Applika- allermeisten Fällen immunologische dung eines Markermoleküls mit- den Institutionen in dem Bereich der tionen dieses Testformates ist der Verfahren bevorzugt, da sie im Ver- tels eines spezifischen Antikörpers Lebensmittelallergene, dem FARRP Nachweis von menschlichem Chori- gleich zur PCR deutlich robuster, an das nachzuweisende Antigen. (Food Allergy Re-search & Resour- ongonadotropin (hCG), einem Pep- günstiger, in der Durchführung ein- Durch das Markermolekül, in den ce Program der University of Ne- tidhormon, dessen Nachweis im facher und weniger störungsanfäl- meisten Fällen ein Enzym, wird ein braska-Lincoln) Institut, entwickelt. Blut oder Urin einer Frau ein sehr lig sind. Ferner liegt der Einsatz im- Signal erzeugt, welches detektiert wichtiger Indikator für eine beste- munologischer Verfahren näher, da und quantifiziert werden kann. Bis Kapillardiffusions- hende Schwangerschaft ist. 1997 es sich bei den Allergie auslösenden heute wurde eine Vielzahl von un- (Schnell-) Test wurde von Mills und Co-Autoren Agenzien schließlich auch um Pro- terschiedlichen Assaytypen beschrie- der erste Streifentest zum Nach- teine handelt. ben, denen jedoch einige generel- Der Allergen-Streifentest, synonym weis von Erdnuss-Allergen (Cona- le Prinzipien zugrunde liegen, die häufig auch als Kapillardiffusionstest, rachin) in Lebensmitteln beschrie- Immunologische Methoden je nach Bedarf und speziellen An- Immunfiltrationstest, flowthrough ben. In den letzten Jahren hat sich forderungen modifiziert werden. Test, Lateral-Flow device oder Dip- sowohl die akademische wie auch Immunologische Verfahren zum stick bezeichnet, eignet sich auf- die industrielle Forschung auf die Nachweis von Allergenen beru- Sandwich-ELISA grund seiner einfachen und schnel- Entwicklung von schnellen und ein- hen auf der Erkennung eines Ana- len Durchführbarkeit besonders gut fachen Allergentesten fokussiert. lyten durch spezifische Nachweis- Mittlerweile sind verschiedene ELI- als Screening- bzw. Suchtest. Der- moleküle, den sogenannten Anti- SAs für die wichtigsten allergenen artige Verfahren sind dazu geeig- Beim Kapillardiffusions-(Schnell-) körpern. Dabei erfolgt diese Erken- Lebensmittel kommerziell erhältlich. net schnell, einfach und mit ge- Test handelt es sich meist um ei- nung hoch spezifisch, nach dem Gemessen an der Anzahl der Publi- ringem Kostenaufwand etwaige nen 1-Schritt Nachweis. Der wäss- Schlüssel-Schloss-Prinzip. Die weite kationen und der verfügbaren ELI- Kontaminationen auszuschließen. rige Probenextrakt wandert durch Verbreitung von immunologischen SAs ist der „Sandwich“-ELISA das Sie ermöglichen eine Trennung der eine Reagenzzone, die farbmar- Verfahren in der Labordiagnostik am häufigsten angewandte Test- einwandfreien Ware von der kon- kierte Allergen-spezifische Antikör- ist im Wesentlichen durch zwei prinzip. Die Bezeichnung rührt vom taminierten, oder bieten eine Ent- per enthält. Bei Anwesenheit der Eigenschaften begründet: Die in prinzipiellen Aufbau des Assays her: scheidungshilfe bei der Freigabe gesuchten Proteine (Antigene) bil- vielen Fällen relativ einfache und Das Antigen befindet sich zwischen schnelle Durchführung der Assays zwei spezifischen Antikörpern, ähn- sowie die Fähigkeit, die gesuchte lich wie beim klassischen Sandwich Substanz aus einer Vielzahl unter- der Belag zwischen zwei Brotschei- schiedlicher Stoffe, die im millio- ben. Diese Art des ELISAs eignet nenfachen Überschuss gegenüber sich insbesondere zum Nachweis der gesuchten Substanz vorliegen, von größeren Peptiden und Prote- nachzuweisen. inen, die mindestens zwei Epitope aufweisen. Das heißt, das Antigen Unter den immunologischen Ver- muss eine gewisse Größe haben, fahren zum Nachweis von Aller- welche die Bindung zweier Antikör- genen finden speziell Enzyme-Lin- per sterisch ermöglicht. Durch die- ked Immunosorbent Assays (ELI- sen zweiseitigen Nachweis der Ziel- SAs) und Lateral Flow Tests, auch proteine kann zum einen die Spe- Kapillardiffusions(Schnell-)Tests, oder zifität erhöht und zum anderen die Dipstick-Tests genannt, ein breites Störanfälligkeit gegenüber Matrix- Abb. 2: Einzigartiges Design. Die Reveal® 3-D Allergen Testkits verfü- Anwendungsgebiet. bestandteilen verringert werden. gen über eine 3-zeilige Anzeige. 6
det sich ein Antigen-Antikörperkom- Reaktionspartner durch den Strei- plex. Prinzipiell handelt es sich bei fen von großer Bedeutung ist. Die diesen Testen um eine vereinfachte chromatographische Fließgeschwin- ELISA-Version, bei denen die Anti- digkeit beeinflusst die Verweildauer körper oder die Antigene auf einer und Reaktionsfähigkeit der einzel- Membran anstelle einer Mikrotiter- nen Komponenten untereinander platte immobilisiert sind. und kann dementsprechend das Ergebnis verfälschen. Die visuelle Hinsichtlich der Probenmatrices und Auswertung bedingt, im Vergleich der Sensitivität ist jedoch der Streif- zur hauptsächlich fotometrischen entest eingeschränkter als der ent- Auswertung der ELISA, meist eine sprechende ELISA. Dieser Tatbe- geringere Sensitivität. Gleichwohl stand ist bedingt durch die Funk- konnte gezeigt werden, dass mo- tionsweise des Tests und der visu- derne Lateral-Flow-Teste den ELI- ellen Auswertung. Schließlich han- SA-Verfahren in Puncto Spezifität delt es sich hier um eine Kombina- und Sensitivität nicht wesentlich tion aus chromatographischen und nachstehen. Dadurch, dass die La- Abb. 3: Aufbau der Reveal® 3-D Allergen Testkassetten aus einem Plas- immunologischen Verfahren, bei teral-Flow-Tests sehr einfach in ihrer tikgehäuse und verschiedenen mit einander verklebten Membranen. der die Fließgeschwindigkeit der Handhabung sind und relativ rasche Ergebnisse liefern, können sie das Allergenscreening für lebensmittel- produzierende Betriebe erleichtern. Reveal® 3-D Allergen Testkit Einzigartiges Design Durch das einzigartige Design verfü- gen die Reveal® 3-D Allergen Test- kits über eine 3-zeilige Anzeige (s. Abbildung 2). Diese Tests können praktisch überall zum qualitativen Nachweis von Allergenrückstän- den in Oberflächen(Umwelt-)pro- ben (Abstrichtupfer) und “clean-in- place” Spülwasser eingesetzt wer- den. Der Test kann, abhängig von der Matrix und gegebenenfalls nach entsprechender Validierung, auch zum Screening von Lebensmitteln verwendet werden. Die einmalige 3-D Technologie des Tests gewähr- leistet eine große Prüfzuverlässlich- keit beim Allergen Screening. Funktionsweise Bei den Reveal® 3-D Allergen Testen handelt es sich um 1-Schritt Kapillar- diffusions-(Schnell-)Teste. Der wäss- rige Probenextrakt wandert dabei durch eine Reagenzzone (Reagenz- membran), die mit spezifischen An- tikörpern (den Detektions-Antikör- pern) beschichtete blaue Polystyrol- Latexpartikel enthält (siehe Abbil- dung 3). Bei Anwesenheit der ge- suchten Allergene bildet sich ein Antigen-Antikörperkomplex (s. Ab- Abb. 4: Funktionweise der Reveal® 3-D Allergen Testkassetten. bildung 4). Ein zweiter spezifischer 1 2011 7
Abb. 6: Mäanderförmige Tupferführung. Falls möglich für eine best- mögliche Reproduzierbarkeit eine repräsentative Fläche von 10 x 10 cm gleichmäßig mit einem sterilen Allergen-freien Tupfer (Swab) bepro- ben. Der Tupfer wird dabei unter Drehen mäanderförmig über die zu untersuchende Fläche geführt. Anschließend wird dieser Vorgang im rechten Winkel zum ersten Durchgang, ein weiteres Mal wiederholt. dung des Tests mit Allergenprote- Lösungen gebrauchsfertig dem Kit inen an (Antikörpermenge aufge- bei. Dies erlaubt eine Testdurch- Abb. 5: Bestandteile des Kits: Jeder der Reveal® 3-D Allergen Teste braucht). An der Position C, der führung, einschließlich Extraktion, enthält neben einer Gebrauchsanleitung, 10 Reveal® 3-D Testkasset- Kontrolllinie, findet eine physika- direkt Vor-Ort in Echtzeit (s. Ab- ten für das gesuchte Allergen (entweder Casein, Ei, Erdnuss, Gluten, lische Bindung der Latexpartikel bildung 5). Haselnuss, Krebstiere (Crustacea), Mandel oder Soja), 10 vorportio- statt. Ohne die „Overflow“-Linie nierte Tütchen mit der geeigneten gebrauchsfertigen Extraktionslö- würde eine Probe mit sehr hohen Probenvorbereitung sung, 10 Probenröhrchen mit passenden Deckeln sowie 10 individuell Allergenkonzentrationen fälschlich verpackte sterile Abstrichtupfer mit abbrechbarer Spitze. als negativ interpretiert werden. In Abhängigkeit von der Natur der Probe existieren verschiedene Pro- Antikörper (Fänger-Antikörper) ist kann und die Linie T damit nicht Testvorbereitung und tokolle für die Testdurchführung (s. in einer weiteren Zone der Mem- bzw. nur schwach erscheint. An Probennahme Abbildung 7). Grundsätzlich ist zu bran immobilisiert (T-Position), in der Position O findet eine Kompe- beachten, dass lediglich eine ge- der dann der Antigen-Antikörper- tition zwischen freiem und gebun- Die Probenvorbereitung nimmt nur ringe Probenmenge (0,25 g oder Komplex konzentriert und gebun- denem Antigen statt. Sobald freies wenige Minuten in Anspruch und 0,25 ml) benötigt wird, daher ist es den wird. Durch das Herausfan- Antigen im Überschuss vorhan- erfordert weder Laborschüttler, Was- besonders wichtig, eine proportio- gen der farbmarkierten Latexpar- den ist, erscheint die Linie O nicht serbad noch sonstige Laborgerät- nale und repräsentative Menge an tikel entsteht eine sichtbare blaue mehr und zeigt damit die Überla- schaften. Des Weiteren liegen alle Probe zu testen. Bande (s. Abbildung 4B). Bei Ab- wesenheit der gesuchten Allergen- proteine können sich die ungebun- denen Latexpartikel nicht an der Position T binden und folglich fehlt diese Testbande (s. Abbildung 4A). Ungebundene Latexpartikel fließen weiter und werden an den Positi- onen O (= mit gesuchtem Allergen- protein beschichtet) und C (=phy- sikalische Bindung der Latexparti- kel) gebunden (s. Abbildung 4B). Die Reveal® 3-D Technologie hat mit dem sogenannten „Overflow“- Signal das Ziel, den sogenannten „High Dose Hook Effekt“ abzubil- den, der im Sandwich Lateral-Flow- Verfahren (Linie T) auftreten kann, wenn die Antigenmenge die An- tikörpermenge übersteigt (s. Ab- bildung C & D). In diesem Fall bin- den sich die Antigene nicht nur an den freien Antikörper-Latex-Kom- plexen, sondern auch an den ge- bundenen Antikörpern, so dass der Antikörper-Antigen-Antikörper-La- Abb. 7: Testdurchführung in Abhängigkeit von der Beschaffenheit der Probe: Beprobung von Spülwasser, texkomplex nicht mehr entstehen Oberflächen oder einer soliden Lebensmittelprobe. 8
Validierung Parameter Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Reveal®3-D Casein * Ei * Erdnuss * Gluten * Haselnuss ** Krebstiere * Mandel * Soja * Target Casein Ovomucoid Conarachin Gluten - Tropomyosin - - (Gal d 1) (Ara h 1) Sensitivität - < 0,1 ppm (< 0,5 ppm (< 5 ppm (< 1 ppm (< 0,1 ppm (< 0,5 ppm (< 0,1 ppm (< 1 ppm (< 0,00001%) 0,00005 %) 0,0005 %) 0,0001 %) 0,00001%) 0,00005 %) ge- 0,00001%) 0,0001 %) So- Casein, 1 ppm (< extrahiertes Erdnuss in pro- Weizen-Glu- entfettete Ha- kochter Garne- Mandelprote- japrotein extra- 0,0001%) Gesamteipro- zessierten Nah- ten selnussprote- len-Extrakt & 1 in, 0,06 ppm hiert aus Do- Caseinate tein rungsmitteln ine; 0,06 ppm ppm (< 0,0001 (< 0,000006 Soy; 2,5 ppm (< 0,000006 %) Crustaceen- %) Gesamt- (< 0,00025 %) %) Gesamt- protein Mandel Sojaprotein ex- Haselnuss trahiert aus- prozessierter Soja (HiSoy) Spezifität Kreuzreak- Kreuzreaktivität zu Kreuzreakti- keine Kreuzre- detektiert ne- Kreuzreakti- folgende Arten Kreuzreaktivi- Kreuzreaktivi- tivität Schafs- & Ziegen- vität zu 10 % aktivität mit an- ben Weizen vität zu > 60 ergaben ein posi- tät zu Apriko- tät zu 100 % milch Enten-Eiklar & deren Nüssen, Gluten auch ppm Gesamt- tives Signal: Krab- senkernen; kei- Hülsenfrüchte 0,1 % Wach- Leguminosen, Roggen & Walnuss; kei- ben, Krabe, Hum- ne Kreuzreak- tel-Eigelb; kei- Dörrgemüse, Gerste, darü- ne Kreuzreak- mer, Nordseegar- tivität zu an- ne Kreuzre- Samen ber hinaus sind tivität mit an- nele, Riesengar- deren Nüssen, aktivität zu keine weiteren deren Nüssen, nele, Kaisergra- Leguminosen, Gänse-Eiklar, Kreuzreaktivi- Leguminosen, nat (Kaiserhum- Dörrgemüse, Strauss-Eiklar, täten bekannt, Dörrgemüse, mer), Flusskrebs, Samen Wachtel-Eiklar, Ausnahme Samen Jacobsmuschel, Enten-Eigelb, brauner Lein- Auster, Miesmu- Gänse-Eigelb samen (jedoch schel, Herzmu- konnte eine schel & Tinten- Gluten-Konta- fisch lediglich Ve- mination nicht nusmuscheln er- ausgeschlos- gaben ein nega- sen werden) tives Signal Wiederfin- 5 ppm in Milch, 1 ppm Eiklar- - 10 ppm Wei- 1 ppm Hasel- 5 ppm gekochter 1 ppm Man- 2,5 ppm pro- dung nach Margarine, Cerea- protein in Mar- zen Gluten-Ex- nuss-Extrakt in Garnelen-Extrakt del-Extrakt in zessierte Soja Dotierung lien, Biskuit, Scho- garine, Biskuit trakt in Würs- Haselnussöl, in Pflanzenöl, 10 Mandelöl, Bis- (HiSoy) ge- kolade, Würst- & Tomatenket- ten & Biskuit, Biskuit, vege- ppm in Mayon- kuit, veteta- kochten Würs- chen chup, 5 ppm 20 ppm in Ba- tarischen Sup- naise & Fisch- rischen Sup- ten, 10 ppm in Fishcake, Eis- bynahrung & penwürfeln; Bouillonwürfel, penwürfeln; Margarine, 20 creme & Scho- Joghurt, 50 1 ppm Dotie- 40 ppm in fein 1 ppm Dotie- ppm in Biskuit, kolade ppm in Scho- rung in Scho- gehacktem Fisch, rung in Scho- Eiscreme und koladenku- kolade und To- 50 ppm in Surimi- kolade und To- Milchpulver, 5 chen matenpaste Sticks & Seafood matenpaste ppm in dunkler wird erst nach Sauce wird erst nach Schokolade einer 1:10 Ver- einer 1:10 Ver- dünnung de- dünnung de- tektiert tektiert Wieder- > 62,1 % Präzisi- > 88 % Präzi- 100 % Präzisi- > 90 % Präzi- > 84 % Präzi- > 69 % Präzision, > 90 % Präzi- > 82 % Präzi- findung in on; eventuell Kon- sion; eventuell on bei Proben sion; eventuell sion; eventuell eventuell Kon- sion; eventuell sion; eventuell nicht „ge- tamination oder Kontamination > 5 ppm Kontamination Kontamination tamination oder Kontamination Kontamination spikten“ Prozessierungs- oder Prozessie- oder Prozessie- oder Prozessie- Prozessierungs- oder Prozessie- oder Prozessie- Handels- effekte rungseffekte rungseffekte rungseffekte effekte rungseffekte rungseffekte proben „gespikte“ 4,6 ppm Ei- 25 ppm NIST detektiert zwi- 1 ppm 20 ppm gekoch- 1 ppm - Handels- klarproteine in SRM 2387 Erd- schen 15,6 ter Garnelen-Ex- proben verschiedenen nussbutter und 89,9 ppm, trakt in Weizen- Matrices detektiert Glu- mehl, 50 ppm ten in verschie- in Sojamehl, 20 denen Bier- ppm in Milchpul- sorten ver, 20 ppm in gemahlenen Erd- nüssen, 10 ppm in Ei, 10 ppm in Kokosnuss, 10 ppm in Stär- ke, detektiert ge- kochten Garne- len-Extrakt nicht in öligem Fisch (Anchovy), & roh- em Fisch auf- grund deren ho- hen Proteingehalt 1 2011 9
Inter- und - Bandenstärke ver- Bandenstär- Bandenstär- Bandenstär- Bandenstär- Bandenstärke ver- Bandenstär- Bandenstär- Intra-Varia- gleichbar zwi- ke vergleich- ke vergleich- ke vergleich- ke vergleich- gleichbar zwi- ke vergleich- ke vergleich- blität schen verschie- bar zwischen bar zwischen bar zwischen bar zwischen schen verschie- bar zwischen bar zwischen denen Chargen verschiedenen verschiedenen verschiedenen verschiedenen denen Chargen verschiedenen verschiedenen und Anwendern Chargen und Chargen und Chargen und Chargen und und Anwendern Chargen und Chargen und Anwendern Anwendern bei Anwendern Anwendern Anwendern Anwendern 1 ppm Erdnuss- bei 0,1 ppm bei 0,1 ppm bei 1 & 2,5 protein Haselnusspro- Mandelpro- ppm extra- tein tein hierte Sojapro- teine aus Do- Soy & HiSoy Robust- Konditi- Probeneinwaage Probeneinwaa- Probeneinwaa- Probenein- Probeneinwaa- Probeneinwaage Probeneinwaa- Probeneinwaa- heit ** onen wel- +/- 10 %; Extrak- ge +/- 10 %; ge +/- 10 %; waage +/- 10 ge +/- 10 %; +/- 10 %; Extrak- ge +/- 10 %; ge +/- 10 %; che die tionspuffer +/- 10 Extraktions- Extraktions- %; Extrakti- Extraktions- tionspuffer +/- 10 Extraktions- Extraktions- Funktiona- % ; Puffer-Tempe- puffer +/- 5 %; puffer +/- 10 onspuffer +/- puffer +/- 5 %; % ; Puffer-Tempe- puffer +/- 5 %; puffer +/- 5 %; lität nicht ratur 2-8 °C oder Puffer-Tempe- % ; Puffer-Tem- 10 % ; Puf- Puffer-Tempe- ratur 2-8 °C oder Puffer-Tempe- Puffer-Tempe- beeinflus- RT; Extraktionszeit ratur 2-8 °C peratur 2-8 °C fer-Tempera- ratur 2-8 °C RT; Extraktionszeit ratur 2-8 °C ratur 2-8 °C sen 1 min +/- 30 sec; oder RT; Ex- oder RT; Extrak- tur 2-8 °C oder oder RT; Ex- 1 min +/- 30 sec; oder RT; Ex- oder RT; Ex- Extraktion: schüt- traktionszeit tionszeit 1 min RT; Extraktions- traktionszeit Extraktion: schüt- traktionszeit traktionszeit teln oder rühren; 1 min +/- 30 +/- 1 min; Ex- zeit 1 min +/- 1 min +/- 30 teln oder rühren; 1 min +/- 30 1 min +/- 30 Inkubationszeit 5 sec; Extraktion: traktion: schüt- 30 sec; Extrak- sec; Extraktion: Inkubationszeit 5 sec; Extraktion: sec; Extraktion: min +/- 1 min schütteln oder teln oder rüh- tion: schütteln schütteln oder min +/- 2 min schütteln oder schütteln oder rühren; Inku- ren; Inkubati- oder rühren; rühren; Inku- rühren; Inku- rühren; Inku- bationszeit 5 onszeit 5 min Inkubations- bationszeit 5 bationszeit 5 bationszeit 5 min +/- 2 min +/- 2 min zeit 5 min +/- min +/- 2 min min +/- 2 min min +/- 2 min 2 min Abstrich - detektiert < 5 µg detektiert 5 detektiert 1 detektiert 20 detektiert 5 µg detektiert 20 µg detektiert 5 µg detektiert 10 Casein / 25 cm2 µg Eiklarprote- ppm NIST SRM µg Gluten / 25 Haselnusspro- gekochter Garne- Mandelprote- µg Sojaprote- auf Plastik-, Te- in / 25 cm2 auf 2387 Erdnuss- cm2 auf Pla- tein / 25 cm2 len-Extrakt / 25 in / 25 cm2 auf in / 25 cm2 auf flon- und Edel- Plastik-, Teflon- butter im Puffer stik-, Teflon- auf Plastik-, Te- cm2 auf Plastik- & Plastik-, Teflon- Plastik- & Te- stahl-Oberfläche und Edelstahl- und Edelstahl- flon- und Edel- Edelstahl-Ober- und Edelstahl- flon-Oberflä- Oberfläche Oberfläche stahl-Ober- fläche und 10 µg Oberfläche che und 20 µg fläche auf Tefon-Ober- auf Edelstahlo- fläche berfläche * detaillierte Validierungsunterlagen sind auf Nachfrage bei Neogen erhältlich. ** Robustheit wurde modifiziert nach der Methode von Youden & Steiner, Statistical of the AOAC, 1975 bestimmt. Tab.: Validierungsdaten. Beprobung von Spülwasser Beprobung von Oberflä- Oberflächen. Auf diese Weise kön- Oberflächen muss der Tupfer vor (“Clean-in-place”) chen mittels Abstrichtupfern nen Oberflächen auf die Anwesen- der Probennahme mit dem Ex- (Swabs) heit von Allergenrückständen getes- traktionspuffer benetzt werden. 1. Tütchen mit dem Puffer auf- tet werden. Diese Methode kann Hingegen entfällt ein befeuch- schneiden oder -reißen und Die mitgelieferten Abstrichtupfer zur Validierung und Kontrolle des ten auf nassen Oberflächen. Nach- anschließend Inhalt komplett in sind bestimmt zur Beprobung von Reinigunsprozesses eingesetzt wer- folgend wird eine definierte das beiliegende Probenröhrchen den, wodurch u.a. Problemzonen Fläche, meist 10 x 10 cm, mäan- überführen. aufgezeigt werden, wie beispiels- derförmig mittels Tupfer beprobt. 2. 0,25 ml der Spülwasserprobe in weise unerwünschte Allergenrück- Dieser Vorgang wird im rechten das Probenröhrchen geben. Falls standsansammlungen in und auf Winkel zum ersten Durchgang, keine Pipette zur Hand ist, so den Produktionsanlagen. ein weiteres Mal wiederholt können 0,25 ml grob geschätzt (s. Abbildung 6). werden, indem einer der wei- 1. Tütchen mit dem Puffer aufschnei- 4. Die Baumwollspitze des Tupfers ßen Probenröhrchen-Deckel zur den oder -reißen und anschlie- wird nach der Beprobung an Hälfte befüllt wird. Derartig er- ßend Inhalt komplett in das der vorperforierten Stelle abge- zielte Testergebnisse sind jedoch beiliegende Probenröhrchen brochen und in das mit Puffer weniger akkurat. überführen. gefüllte Probenröhrchen über- 3. Probenröhrchen mit dem wei- Abb. 8: Die Reveal® 3-D Allergen 2. Eine Fläche von 10 cm x 10 cm führt. In der Folge wird das Röhr- ßen Deckel verschließen und die Testkassette wird mit dem Proben- beproben. Alternativ können auch chen mit dem weißen Deckel Probe eine Minute lang per Hand auftragsfenster in den mit dem Problemzonen mit anderen Ab- verschlossen und die Tupferspit- schütteln. Probenextrakt gefüllten weißen messungen beprobt werden. ze eine Minute lang per Hand Die Proben können nachfolgend Deckel des Probenröhrchens ge- 3. Oberfläche mittels der mitgelie- ausgeschüttelt. direkt in den Test eingesetzt wer- stellt und nach 5 Minuten visuell ferten, sterilen Abstrichtupfer Die Proben können nachfolgend di- den. ausgelesen. (Swab) beproben. Auf trockenen rekt in den Test eingesetzt werden. 10
3. Die 3-D Kassette in den Deckel solange eintauchen bis die Flüssigkeit im Testfenster auf- steigt. 4. Anschließend die 3-D Kassete auf eine ebene Fläche legen und den Test nach 5 Minuten visuell auslesen (s. Abbildung 2). Auswertung Die Reveal® 3-D Allergen Teste wer- den bereits nach 5 Minuten visuell ausgelesen. Dabei steigt die Flüs- sigkeit chromatographisch in dem Testfenster auf. Wenn in Position C keine deutliche Bande sichtbar Abb. 9: Auswertung der Reveal® 3-D Allergen Testkassetten. ist, gilt der Test als nicht auswert- bar und muss dem entsprechend wiederholt werden. Eine fehlende Bande in der Posi- tion T (Test Linie) bedeutet, dass keine Allergen-Rückstände detek- tiert wurden (negatives Ergebnis). Hingegen besagt eine Bande in der Position T (Test Linie) – egal wie schwach oder stark die Linie erscheint – dass die untersuchte Probe positiv auf das untersuchte Allergen getestet wurde (posi- tives Ergebnis). Ist in der Position Abb. 10: Reveal® 3-D Allergen.Test Vielfalt: Casein, Ei, Erdnuss, Gluten, Haselnuss, Krebstiere (Crustacea), O (“Overload” Linie) keine Bande Mandel und Soja erhältlich. sichtbar und ist in der Position T (Test Linie) die Bande nur schwach sichtbar oder nicht vorhanden, so Lebensmittelproben Darüber hinaus können analog z.B. die Alert® oder Veratox® All- bedeutet dies, dass die Probe mit auch Lebensmittelproben analy- ergen Testsysteme. dem gesuchten Allergen überla- Die Proben müssen zunächst mit- siert werden. Trotz umfangreicher den ist (s. Abbildung 9). tels Getreidemühle, Mixer oder ähn- Validierungsarbeiten gibt es u.U. Bereits durchgeführte Validierungen lichem zerkleinert werden (s. Ab- Matrices, die sich nur bedingt zur von Rohstoffen sollten wiederholt Einsatzmöglichkeiten bildung 7). Analyse mit diesen Kits eignen. An- werden, wenn ein Wechsel der in der Lebensmittel- wendern wird aus diesem Grunde Rohstofflieferanten eintritt oder verarbeitung 1. Zur Extraktion werden 0,25 g empfohlen, Matrix-spezifische Va- Veränderungen des Herstellungs- vermahlene Probe oder circa lidierungen durchzuführen, indem prozesses durchgeführt werden. Die Reveal® 3-D Allergen Teste sind eine halbe Füllung des Proben- die Wiederfindung von gespikten für die unterschiedlichsten Aspekte röhrchendeckels mit einem Beu- Proben mit einem validierten Lab- Testdurchführung des Allergen-Managements geeig- tel Extraktionspuffer versetzt. ortest, wie z.B. den Veratox® All- net. Im Grunde ermöglichen die- 2. 1 Minute schütteln. ergen Kits, verglichen wird. 1. Deckel vom Probenröhrchen ent- se Teste von der Rohwarenanlie- Die Proben können nachfolgend fernen und mit der Extraktions- ferung, Lagerung, Verarbeitung, direkt in den Test eingesetzt wer- Diese Vorgehensweise gewährlei- flüssigkeit aus dem Röhrchen Transportvorgängen bis hin zur Ver- den. stet die eindeutige Identifizierung befüllen. Eventuell vorhandener packung alle Allergen-relevanten von problematischen Matrices und Schaum sollte im Röhrchen ver- „Hot Spots“ zu überprüfen (s. Ab- Die Reveal® 3-D Allergentests wur- ermöglicht auch eine Bestimmung bleiben. bildung 11). den mit dem Focus entwickelt, Al- der entsprechenden Nachweisgren- 2. Die 3-D Kassette in den Deckel lergenrückstände wie Casein, Ei, ze. Gleichwohl wird im Allgemei- eintauchen (s. Abbildung 8). Da- Aufgrund der ebenso schnellen Erdnuss, Gluten, Haselnuss, Krebs- nen empfohlen, dass zur Untersu- bei ist darauf zu achten, dass wie einfachen Probenvorbereitung tiere (Crustacea), Mandel und Soja chung von komplexen Lebensmit- die Vertiefung mit dem Proben- und Testdurchführung, ermöglicht in Spülwässern und Umweltpro- telproben eine breiter gefächerte auftragsfenster vollständig in die dieses Testformat eine Allergenü- ben nachzuweisen. Testmethode eingesetzt wird, wie Flüssigkeit eintaucht. berwachung in Echtzeit. 1 2011 11
Wareneingang und Lager 7 Verschüttungen Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Überpfrüfung der Reinigung 1 Zulieferektte Auditierung Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Allergenkontrolle 8 In-Process und „Re-Work“ 2 Wareneingang Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Detektion von potenziellen Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Bestätigung der Lieferantenspe- Kreuzkontaminationen zifikationen Endprodukt und Lagerhaus 3 Lager Verwendung von Neogen-Allergen-Kits, um sicherzustellen, dass die un- 9 Fertigware terschiedlichen Roh- und Inhaltsstoffe hinsichtlich ihrem Allergen-Potential Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Überprüfung der Produktions- zuverlässig getrennt gelagert werden, sowie dass deren Verpackungen kennzeichnung unversehrt sind. 10 Lager Verarbeitung und Verpackung Verwendung von Neogen-Allergen-Kits, um sicherzustellen, dass die unter- schiedlichen Endprodukte hinsichtlich ihrem Allergen-Potential zuverlässig 4 Oberflächen zur Lebensmittelherstellung getrennt gelagert werden, sowie dass deren Verpackungen unversehrt Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Validierung der Reinigung und sind. Aufdeckung von Kreuzkontaminationen 11 Verschüttungen 5 Equipment und Gerätschaften Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Überprüfung der Reinigung Verwendung von Neogen-Allergen-Kits zur Validierung der Reinigung und 6 Aufdeckung von Kreuzkontaminationen 12 Endprodukt zu Lieferkette Verwendung von Neogen-Allergen-Kits für Audits und zur Durchsetzung Abb. 11: Überwachung der Allergen-relevanten Hot-Spots innerhalb der Wertschöpfungskette in einem Lebensmittelproduzierenden Unter- nehmen. Reveal® 3-D Allergenteste wendeten Anlagen, noch während tung einer korrekten Produktkenn- portfolio umfasst neben den hier schaffen Abhilfe der Produktion bzw. direkt nach zeichnung und bei der Vermeidung beschriebenen Lateral Flow Test- deren Reinigung, auf eventuell vor- von Kreuzkontaminationen wäh- kits auch noch ELISAs sowohl zur Die Reveal® 3-D Allergenteste sind handene Allergene (s. Abbildung rend des Produktionsprozesses. Die qualitativen (Alert®) als auch zur für den Einsatz in der industriellen 11). Mit diesem einfachen Scree- Produktpalette von Neogen bein- quantitativen Bestimmung (Vera- Lebensmittel-Produktion bzw. -Ver- ningverfahren liegen die Ergeb- haltet verschiedene Testsysteme tox®) der gesuchten Allergene. So- arbeitung vorgesehen sowie für das nisse bereits nach wenigen Mi- zum Nachweis der wichtigsten All- mit ist Neogen in der Lage, maß- zum Einhalten der gesetzlichen Vor- nuten mit hoher Nachweisemp- ergene. Jedes dieser Verfahren bie- geschneiderte Lösungen für unter- schriften nötige Testen hinsichtlich findlichkeit vor. tet viele Vorteile: eine einfache Pro- schiedlichste analytische Fragestel- der Lebensmittelkennzeichnung. benvorbereitung, eine kurze Analy- lungen zu liefern. Diese einfach zu handhabende Al- senzeit und eine denkbar einfache Die Teste detektieren zuverlässig lergenanalytik bietet den Herstel- Auswertung. Literaturnachweis und Allergenrückstände in Spülwäs- lern die Möglichkeit, versteckte Referenzen auf Anfrage sern und Umweltproben bzw. Ab- Al-lergene durch Identifizierung In enger Kooperation mit dem Food strichtupfern. Sie ermöglichen die kritischer Produktions- und Logistik- Allergy Research and Resource Pro- direkte Überprüfung der Lebens- punkte frühzeitig zu erkennen und gram (FAARP) entwickelt Neogen mittelprodukte bzw. des Produk- dauerhaft zu überwachen. bereits seit 1998 routinetaugliche tionsumfeldes (s. Abbildung 11). Allergen-Nachweisverfahren, die NEOGEN Europe Ltd. Beispielsweise ermöglichen die Allergen-Testsysteme sich im Besonderen durch einheit- The Dairy School Reveal® 3-D Allergenteste, auf- für jeden etwas! liche und standardisierte Testfor- Auchincruive grund ihrer einfachen und schnel- mate und -durchführungen für alle KA6 5HW Ayr, Great Britain len Anwendbarkeit, die Überprü- Das Neogen Allergen-Leistungs- Allergen-Testsysteme auszeichnen. www.neogen.com fung bzw. Überwachung der ver- spektrum hilft bei der Gewährleis- Neogen´s umfangreiches Produkt- 12
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