Autoimmunerkrankungen - Autoantikörper-Stufendiagnostik bei Autoimmunerkrankungen Wissenschaftlich-medizinischer Hintergrund
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FachInformation - Immunbiologie/Klinische Chemie
Autoimmunerkrankungen
Autoantikörper-Stufendiagnostik bei Autoimmunerkrankungen
Wissenschaftlich-medizinischer Hintergrund Autoimmunerkrankungen wie der autoimmunen He-
patitis, bei vielen Infektionserkrankungen sowie ggf.
Stufe 1: Antikörper-Screening mittels IFT – ein multi- bei gesunden Personen vor.
spezifischer Suchtest
Die Stufendiagnostik bei Verdacht auf eine systemi-
sche Autoimmunerkrankung beginnt mit der Bestim-
mung von Autoantikörpern (AAk) gegen Zellkerne,
auch ANA (antinukleäre Antikörper) genannt. Die AAk
Bestimmung gegen intrazelluläre Strukturen (Kern und
Zytoplasma) wird mittels indirekter Immunfluoreszenz-
technik (IFT) auf Objektträgern mit fixiertem mitotisch Abbildung 1: Beispiele für positive Fluoreszenzmuster.
aktivem Zellmaterial (HEp-2-Zellen und Primatenleber- A ANA, homogenes Muster; B ANA, Zentromere;
zellen) erfasst. Die Antikörper im Patientenserum bin- C AMA, Mitochondrien; D ASMA (Bilder: EUROIMMUN AG).
den dabei spezifisch an ihre intrazelluläre Zielstruktur Stufe 2: ENA-Screen (Pool) und AMA, ASMA, LKM,
und werden mittels fluoreszenzmarkiertem Anti-hu- Parietalzellen:
man IgG sichtbar gemacht. Bei einem positiven Test
(Titer 1:>80) wird eine Untersuchung mit serieller Ver- Positive ANA lassen je nach Art und Titer bestimmte
dünnung des Patientenserums (Austitrierung bis Titer Hinweise auf den/die zugrundeliegenden Autoantikör-
1:>10.240) angeschlossen. Je nach Antigenlokalisation per bzw. Erkrankung zu. 95-99 % aller SLE-Patienten
ergibt sich für jeden ANA ein charakteristisches Flu- und 30 % aller RA-Patienten sind ANA positiv. Die hohe
oreszenzmuster, das zusätzlich zum ANA-Titer im Be- Sensitivität korreliert allerdings mit einer nur geringen
fund angegeben wird. Spezifität. Auch bei Gesunden, vor allem bei älteren
Patienten (>60 Jahre) sind niedrigtitrige ANA nach-
Da die Membran vitaler Zellen für freie Antikörper grund- weisbar, allerdings ohne pathogene Relevanz. Sie kön-
sätzlich impermeabel ist, spielen die entsprechenden nen jedoch den Beginn oder die Remission einer Kol-
Autoantikörper nach vorhergehender Sensibilisierung lagenose oder einer autoimmunen Lebererkrankung
in der diagnostischen Relevanz für systemische Autoim- anzeigen (jährliche Kontrolle!). Bei einem positiven
munerkrankungen des rheumatischen Formenkreises, Antikörpernachweis ab einem Titer von 1:320 sollte in
insbesondere für Kollagenosen, eine wichtige Rolle. einem zweiten Schritt, je nach Fluoreszenzmuster und
Ein negatives Testergebnis stellt aufgrund der hohen diagnostischer Fragestellung, eine weitere gezielte Dif-
Sensitivität ein nahezu sicheres Ausschlusskriterium ferenzierung der Subtypen erfolgen:
für einige Kollagenosen (z.B. SLE und Mischkollageno- - Bei einem Kernfluoreszenzmuster und bei möglichen
se/SHARP-Syndrom) dar (hohes negatives prädiktives Überlappungen ist die Bestimmung von Anti-
Ergebnis). Jedoch sollte hier immer die zusätzliche körpern gegen ENA (extrahierbare nukleäre
Bestimmung der SS-A/Ro-Ak erfolgen, da bekannt ist, Antigene) empfohlen. Der ENA-Screen (Pool)
dass ANA, die sich gegen das Antigen SS-A/Ro richten, ist ein ELiA-Testsystem (Enzymimmunoassay) zur
in der IFT nicht immer erfasst werden (Häufigkeit >2%). qualitativen in vitro Bestimmung von IgG-Antikörpern
Hier ist eine spätere Verlaufs-Wiederholung des ANA- und stellt eine Hilfe bei der klinischen Diagnose von
Tests empfohlen. ANA kommen nicht nur bei systemi- SLE, Mischkollagenose, Sjögren-Syndrom, Sklero-
schen Autoimmunerkrankungen, z. B. Kollagenosen dermie und Polymyositis/Dermatomyositis dar. Der
wie SLE oder RA, sondern auch bei organspezifischen ENA-Screen ist ein Gemisch aus den Antigenen
69. Fachinformation - Vers. 1.5-27.01.2020
MVZ Martinsried GmbH Laborgemeinschaft Martinsried Lochhamer Str. 29
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humanen rekombinanten U1-snRNP (RNP70, A, C), Subtyp mögliche Krankheitsassoziation
SS-A/Ro (60 kDa, 52 kDa), SS-B/La, CENP-B, Aktin-Ak Autoimmunhepatitis, ausschl. Virushe-
Scl-70, und Jo-1 Proteinen sowie mit synthetischen patitis notwendig
SmD Peptiden. Bei einem positiven Ergebnis erfolgt LKM-1-Ak Autoimmunhepatitis, ausschl. Virushe-
automatisch die Differenzierung der Reaktivität patitis notwendig
(Stufe 3, monospezifischer Test). Tabelle 1: Subtypen und mögliche Krankheitsassoziation.
- Bei einem homogenen Muster oder bei posi- SLE: systemischer Lupus erythematodes, CREST: Calcinose,
tiven Chromosomen im Mitosestadium empfiehlt sich Raynaud, Oesophagusdysmotilität, Sklerodaktylie, Teleangiek-
zusätzlich die Bestimmung von dsDNA-Antikörpern. tasien; PBC: primäre biliäre Zirrhose
Der dsDNA-Antikörper ist ein krankheitsspezifischer - ENA-Profil (monospezifischer Test mittels ELiA) von
Autoantikörper bei SLE und wird mit einer Prävalenz humanen rekombinanten U1-snRNP (RNP70, A, C),
von 70-90 % festgestellt. SS-A/Ro (60 kDa, 52 kDa), SS-B/La, CENP-B, Scl-70,
- Bei einem rein zytoplasmatischen Fluoreszenzmuster und Jo-1 Proteinen sowie mit synthetischen SmD
empfiehlt sich die Bestimmung von antimitochondrialen Peptiden.
Autoantikörpern (AMA), AK gegen Leber-Niere- - Weitere mögliche AAk-Einzelparameter: RNP70
Mikrosomen (LKM) und Autoantikörper gegen glatte und DFS70 (Exklusionsmarker).
Muskulatur (ASMA) sowie Parietalzellen. Diese
- Bei einem zytoplasmatischen Fluoreszenzmuster
Autoantikörper-Spezifitäten können auf einen
kann eine Subtypenbestimmung der AAk gegen
speziellen IFT Organschnitt (fixierten Leber-,
Aktin, AMA M2-Protein sowie Parietalzellen
VSM47-, Niere- und Magenzellen) bestätigt werden.
(Intrinsic Faktor und H+/K+ ATPase) erfolgen.
Stufe 3: Monospezifischer Test - Autoantikörper Sub-
- Je nach Fragestellung können hier auch zusätzlich
typenbestimmung
spezielle Immunoblots (z.B. Myositis-/ Sklerodermie-
Bei einem positiven ENA-Screen sollte in einem dritten Profile) folgen.
Schritt eine entsprechende Differenzierung der Subty-
pen erfolgen, da diese Autoantikörper eine z.T. deut-
lich höhere Krankheitsspezifität besitzen (s. Tab. 1): Klinische Relevanz
Subtyp mögliche Krankheitsassoziation In verschiedenen retrospektiven und prospektiven
dsDNA-Ak SLE Studien für einige AAk konnte zudem gezeigt werden,
SS-A/Ro-Ak Sjögren-Syndrom, SLE dass diese Monate bis Jahre vor den klinischen Sym-
SS-B/La-Ak Sjögren-Syndrom, SLE ptomen der entsprechenden Autoimmunerkrankung
Scl-70-Ak Sklerodermie bereits nachweisbar sind. Diese Patienten sind dem-
CENP-B-Ak CREST-Syndrom entsprechend engmaschig zu kontrollieren, um früh-
CENP-B-Ak + AMA PBC-Overlap zeitig eine Therapie einleiten zu können.
RNP70-Ak Sharp-Syndrom, MCTD - RF und CCP können Jahre vor der Manifestation der
U1-snRNP-Ak Sharp-Syndrom, MCTD, SLE RA nachweisbar sein. Besonders hoch ist das Risiko
Jo-1-Ak Myositis, Anti-Synthetase Syndrom einer RA-Entwicklung, wenn beide Autoantikörper
SmD-Ak SLE erhöht auftreten.
DFS70-Ak Exklusionsmarker - Bei 88% der SLE-Patienten konnte gezeigt werden,
AMA-M2-Ak PBC dass mindestens einer der SLE AAk (ANA, dsDNA,
Intrinsic Faktor-Ak Vitamin B12-Mangel, Perniziöse Anä- SS-A/Ro, SS-B/La, SmD oder U1-snRNP) bereits bis
mie, Neuropathie zu drei Jahre vor der Manifestation nachweisbar
Parietalzell-Ak Chronisch-atrophische Gastritis, > 60 ist.
Jahre ggf. physiologisch
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ͲW>ͲϮϭϯϱϲͲϬϭͲϬϬFachInformation - Immunbiologie/Klinische Chemie
Indikation Präanalytik
Der Autoantikörper-IFT sollte bei einem klinischen Probenmaterial: 1 ml Serum
Verdacht auf systemische Autoimmunerkrankungen, (Nachforderung möglich innerhalb: 2 Wochen)
z.B. Kollagenosen, Erkrankungen des rheumatischen
Formenkreises und Autoimmunhepatitiden erfolgen. Analysenhäufigkeit: 1-2 mal pro Woche
Die Autoantikörper-Diagnostik bei systemischen Autoimmunerkrankungen ist ein mehrstufiger Prozess:
Abbildung 2: Modell der Autoantikörper-Stufendiagnostik bei Ver- Fragen?
dacht auf eine systemische Autoimmunerkrankung.
Stufe 1 ANA-Screening mittels IFT (multispezifisch). Ihr Kontakt zu uns:
Stufe 2 ENA-Screen (ELiA) und AMA/ASMA/LKM/Parietalzellen (IFT). Telefonkontakt: +49.89.895578-0
Stufe 3 AAk-Subtypenbestimmung (monospezifisch).
E-Mail: info@medizinische-genetik.de
Testprinzip: grün = IFT, blau = ELiA, orange = Blot; grau = Fremdver- Autoren:
sand von speziellen Anfragen (Blot, IFT, AAk). Dr. rer. nat. Isabelle Hodak
*diese AAk Subtypen sind im ENA-Profil enthalten; **Leberblot. Dr. med. Manfred Wick
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