Hygiene und Prophylaxe in der experimentellen Fischhaltung
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Hygiene und Prophylaxe in der experimentellen Fischhaltung Dr. Thomas Meinelt 14 Petra Bartschat, Dr. Dibo Liu, Dr. Christopher Naas Der Hygiene und regelmäßigen Pro- Peressigsäure-haltige phylaxe in der Versuchstierhaltung kommt Desinfektionsmittel versuchtierkunde kompakt 07|21 © bkk eine herausragende Bedeutung zu, um die Mit der Applikation von Peressigsäure (PES)-haltigen Des- Fischgesundheit zu fördern, Fischverluste infektionsmitteln ergibt sich die Möglichkeit einer tier- und zu verhindern und eine gleichbleibende umwelt-freundlichen Prophylaxe und Therapie von erre- Qualität der Versuchstiere zu gewährleis- gerbedingten Erkrankungen sowie einer tierschutzgerech- ten. Im folgenden Artikel wird die Hygieni- ten Anlagenhygiene[ 1 ]. Sie entspricht der „Guten fachlichen sierung mit Peressigsäure-haltigen Desin- Praxis“ in der Tierhaltung. PES ist in verschiedenen Produk- fektionsmitteln vorgestellt. ten unter verschiedenen Handelsnamen verfügbar. Peressig säure ist keine Säure sondern ein Peroxid. Jedoch beinhal- ten die PES-haltigen Produkte Schwefelsäure und Phosphor Fische unterliegen außerhalb ihrer natürlichen Umwelt säure, welche zur Herstellung und Haltung notwendig sind. Stress. Sie können sich ihr Futter nicht selbst suchen und PES existiert in wässriger Lösung immer im Lösungsgleich- können weder aggressiven Artgenossen noch Keimen aus- gewicht von Essigsäure und Wasserstoffperoxid (H2O2 ) auf weichen. Die Haltungsumwelt ist gegenüber der artspezi- der einen und PES (Acetylhydroperoxid; AHP) und Wasser auf fischen Umwelt durch veränderte chemisch-physikalische der anderen Seite (Abbildung 1). Für die aquatische Umwelt Wasserparameter und eine erhöhte Keimdichte gekennzeich- kann PES – bei sachgemäßer Anwendung – als unbedenklich net. Selbst bei scheinbar optimalen Bedingungen, kann es eingestuft werden, da PES letztendlich in Essigsäure, Wasser auf Grund der Haltungsdichte zu einem erhöhten Erkran- und Sauerstoff zerfällt. kungsgeschehen bei den Fischen kommen. Die Therapie von Erkrankungen birgt jedoch verschiedene Probleme. In der Literatur wurden bereits 1902 die hervorragenden Des- Einerseits sind nur wenige Mittel für eine Therapie zuge- infektionseigenschaften der Peressigsäure beschrieben, wel- lassen, andererseits sind medikamentöse Therapien für den che die von Formaldehyd und Chlorverbindungen bei weitem Fisch und die Umwelt mit starken Belastungen verbunden. übertrifft [ 2 ]. Gegen verschiedene Pathogene ist PES in niedri- Chemikalien reichern sich in Fischen und der Umwelt an, gen Konzentrationen hoch wirksam. Auf Grund der unspezifi- Resistenzen werden gefördert und nützliche Mikrobiota schen Wirkung ist eine Ausbildung von Resistenzen unwahr- (z. B. Mikrobiom der Fische und Umwelt) werden geschä- scheinlich. Da es sich um ein selbstdegradierendes Peroxid digt. Der Hygiene und der regelmäßigen Prophylaxe kommt handelt, erfolgt weder eine Bioakkumulation im Fisch noch in der Versuchstierhaltung aus diesem Grund eine heraus- in der Umwelt. Schließlich und endlich ist bei ordnungsge- ragende Bedeutung zu. mäßer Anwendung keine Schädigung der Fische zu erwarten. Essigsäure + H2O2 Acetylhydroperoxid (PES) + Wasser Abb. 1: Peressigsäure-Gleichgewicht
35 35 Wassercortisol [ng/l] 1. Woche 2. Woche Wassercortisol [ng/l] 30 30 Pulsbehandlung (hohe Konzentrationen in größeren Abständen) kontinuierliche Behandlung 25 25 (niedrige Konzentrationen über Tropfenbehandlung) Kontrollgruppe 20 20 15 15 10 10 15 5 5 0 0 versuchtierkunde kompakt 07|21 © bkk 0 10 20 30 40 50 0 10 20 30 40 50 Zeit nach der Pulsbehandlung mit PES [h] Zeit nach der Pulsbehandlung mit PES [h] Abb. 2: Stressantwort von Regenbogenforellen nach PES-Applikationen Abb. 2a) Konzentration an Wassercortisol zum Ende der 1. Applikationswoche | Abb. 2b) Konzentration an Wassercortisol zum Ende der 2. Applikationswoche Applikation im Vergleich zur Kontrollgruppe, stark reduziert. In der Dau- erbehandlungsgruppe (Tropfenbehandlung) hingegen war Am Leibniz-Institut für Gewässerökologie und Binnenfi- ein starker Anstieg des Bewuchses mit Biofilm feststellbar scherei (IGB) wurden Untersuchungen durchgeführt, wie (Abbildung 3 a-c). Das bedeutet, dass in dieser Gruppe die Fische auf PES-Applikationen reagieren [ 3 ]. Regenbogen- Desinfektion von Oberflächen in besetzten Haltungsein- forellen wurden mittels einer Pulsbehandlung (hohe Kon- richtungen nicht erfolgte. Biofilme sind jedoch gefährli- zentrationen in größeren Abständen) oder kontinuierlich che Quellen für Pathogene und müssen wo immer mög- (niedrige Konzentrationen über Tropfenbehandlung) expo- lich beseitigt werden. Eine Unterschreitung der effektiven niert und die Stressantwort untersucht. Als Stressparameter PES-Konzentration kann zu einer Förderung von Biofilmen wurde Cortisol im Wasser gemessen. Wie zu erwarten stieg führen und muss deshalb vermieden werden. die Cortisol-Konzentration bei der Pulsbehandlung stark an, während bei der Tropfenbehandlung und in der Kontroll- gruppe keine Veränderung festgestellt wurde. Aber schon Produktwahl in der 2. Applikationswoche war die Cortisol-Ausschüttung der Fische aller Gruppen nahezu gleich. Die Fische hatten Neben der zu wählenden Prophylaxe-Konzentration kommt sich an die PES-Applikationen adaptiert (Abbildung 2 a/b). der Wahl der PES-Produkte eine große Rolle zu. Obgleich alle Produkte PES, Wasser, H2O2 und Essigsäure enthal- Als wichtiger Nebeneffekt war der Biofilm auf den Oberflä- ten, ist ihre Zusammensetzung sehr unterschiedlich. Die chen der Haltungsbecken in der Pulsbehandlungsgruppe, auf dem Markt befindlichen Produkte unterscheiden sich a (© Dr. Thomas Meinelt) b (© Dr. Thomas Meinelt) c (© Dr. Thomas Meinelt) Abb. 3: Biofilm auf Oberflächen der Haltungsbecken nach PES-Applikation, Abb. 3a: Kontrollgruppe ohne PES, Abb. 3b: Pulsbehandlung 1 mg/l PES, 2 x /Woche, Abb. 3c: Kontinuierliche Behandlung 0,2 mg/l PES
16 insbesondere im molaren Verhältnis von PES und H2O2. desto wahrscheinlicher ist es, dass das Produkt schon im Die Zusammensetzung einer Auswahl an PES-Produkten therapeutisch-wirksamen Bereich toxische Effekte bei den versuchtierkunde kompakt 07|21 © bkk ist in Tabelle 1 ersichtlich. Fischen induziert [ 6 ]. Untersuchungen am IGB belegen, dass einige Pathogene (Flavobacterium columnare, Saprolegnia parasitica) von Strategie PES-Produkten mit höherem H2O2-Anteil und andere Erre- ger (Aeromonas salmonicida, Yersinia rucceri) von PES-Pro- Ein weiterer zu berücksichtigender Punkt ist die Strategie. dukten mit einem höheren PES-Anteil reduziert werden Auf Grund der Diversität der Haltungseinrichtungen, der können [ 4, 5 ]. Die verwendeten Produkte müssen sich des- chemisch-physikalischen Wasserparameter und der unter- halb am zu bekämpfenden Erregerspektrum orientieren. schiedlichen Fischpathogene kann eine Prophylaxe oder eine Behandlungsstrategie nicht verallgemeinert werden. Alle PES-Produkte haben eine unterschiedliche Toxizität gegen Fische und eine unterschiedliche Wirksamkeit gegen Dazu zwei Beispiele, die die indikationsbezogene Anwen- Fischpathogene. Aus diesem Grund ist auch der thera- dung der Peressigsäure verdeutlichen. peutische Index/Quotient (Ith) der Produkte unterschied- lich. Der Ith ist das Verhältnis von mittlerer letaler Konzen- In Abhängigkeit vom Erreger tration (LC 50 Fische) zu mittlerer effektiver Konzentration Ichthyophthirius multifiliis ist ein Einzeller, der in Haltungs- (EC 50 Erreger). Je kleiner der therapeutische Quotient ist, einrichtungen große Verluste verursacht. Sein mehrstufiger ID Produkt Produzent PES H 2O2 PES: H 2 O 2 Lspez Wofasteril L. Spez Kesla Pharma Wolfen GmbH 3% 40 % 0,034 E35 Wofasteril 035 Kesla Pharma Wolfen GmbH 3.5 % 10 % 0,156 SC50 Wofasteril SC50 Kesla Pharma Wolfen GmbH 5% 8% 0,28 AC150 Peracetic acid 15 % AppliChem GmbH 15 % 24 % 0,28 E250 Wofasteril E250 Kesla Pharma Wolfen GmbH 25 % 30 % 0,37 SI400 Peracetic Acid Solution Sigma-Aldrich Co. 39 % 6% 2,91 E400 Wofasteril E400 Kesla Pharma Wolfen GmbH 40 % 12 % 1,49 P15 Peraclean 15 EVONIC 15 % 25 % 0,27 P35 Peraclean 35 EVONIC 35 % 10 % 1,57 Tabelle 1: Zusammensetzung einiger ausgewählter PES-Produkte
17 Lebenszyklus bietet aber die Möglichkeit, sensible Ent- Weiterführende Literatur wicklungsstadien zu bekämpfen und somit den Reinfek- versuchtierkunde kompakt 07|21 © bkk tionszyklus zu unterbinden. Insbesondere die im Wasser 1. EU-Verordnung: Zulassung der Peressigsäurehaltigen Produkten zur mobilen Infektionsstadien (Theronten) und Reprodukti- Desinfektion der organischen (Bio) Aquakulturanlagen in An- und onsstadien (Tomonten) sind mit niedrigen PES-Konzent- Abwesenheit von Aquakulturtieren. https://eur-lex.europa.eu/eli/ reg_impl/2014/1358/oj rationen eindämmbar. Fressstadien in der Haut (Trophon 2. Freer PC, Novy FG (1902) On the formation, decomposition and ger- ten) und enzystierte Tomonten hingegen sind nicht the- micidal action of benzoylacetyl and diacetyl peroxides. Am Chem J rapierbar. Bei diesem Parasiten muss sich die Behandlung 27: 161−193 also auf die bekämpfbaren Stadien konzentrieren und ver- 3. Liu D, Pedersen LF, Straus DL, Kloas W, Meinelt T (2017): Alternative pro- sucht werden, diese gezielt zu reduzieren. phylaxis/disinfection in aquaculture - Adaptable stress induced by per- acetic acid at low concentration and its application strategy in RAS. Aquaculture, 474, 82-85 In Abhängigkeit von der Haltungsart 4. Marchand PA, Phan TM, Straus DL, Farmer BD, Stüber A, Meinelt T (2012): In Kreislaufanlagen hilft eine regelmäßige Reduzierung des Reduction of in vitro growth in Flavobacterium columnare and Sapro- Gesamtkeimgehaltes mittels PES-Applikation die Fischge- legnia parasitica by products containing peracetic acid. Aquaculture sundheit zu stabilisieren, Verlusten vorzubeugen und obli- Research, 43, 1861–1866 gatorische Fischpathogene einzudämmen. Die sehr unter- 5. Meinelt T, Phan TM, Behrens S, Wienke A, Pedersen LF, Liu D, Straus DL (2015): Growth inhibition of Aeromonas salmonicida and Yersinia schiedlichen Bedingungen in den Anlagen verlangen jedoch ruckeri by disinfectants containing peracetic acid. Diseases of aquatic nach sehr unterschiedlichen PES-Konzentrationen. Spezi- organisms, 113, 207–213 ell die chemisch-physikalischen Wasserparameter (Wasser- 6. Spektrum.de, Lexikon der Biologie, zuletzt abgerufen am 13.08.2021 härte, Salzgehalt, Gehalt an organischen Stoffen (DOC)) um 14:45 Uhr unter https://www.spektrum.de/lexikon/biologie/ machen eine Anpassung der verwendeten Konzentrati- therapeutischer-quotient/66253 onen notwendig. Als Faustregel gilt: Je höher der Gehalt an Salz, je höher die Wasserhärte und der Gehalt an DOC, desto höher muss eine PES-Konzentration gewählt wer- den. Zur Vermeidung toxischer Effekte muss ein Herantas- ten an die zu verwendenden Konzentrationen erfolgen, zumal die verschiedenen PES-Produkte unterschiedliche Ith gegen die verschiedenen Erreger besitzen. Die berliner kompaktkurse Fazit sind jetzt bei LinkedIn. Der Hygiene und Prophylaxe in den Haltungseinrichtun- gen kommt große Bedeutung zu. PES-Produkte versetzen uns in die Lage, dies tier- und umweltfreundlich zu realisie- ren. Den zu bekämpfenden Erregern und den Anlagenge- gebenheiten muss beim Einsatz von PES besondere Auf- Besuchen Sie uns! merksamkeit gewidmet werden. www.linkedin.com/in/dr-maren-kaepke-3594a6211
18 versuchtierkunde kompakt 07|21 © bkk © Dr. Thomas Meinelt Dr. Thomas Meinelt Studium, anschließende Diplomarbeit in Fischkrankheiten und Promotion in Fischtoxikologie an der Humboldt-Universität zu Berlin Leitender Wissenschaftler der AG Fischpathologie am IGB Stellvertretender Leiter der Abteilung für Ökophysiologie und Aquakultur IGB Aktuelle Forschungsgebiete: Fischtoxizität von Abwässern der Kalibergbauindustrie sowie alternative In folgenden Kursen können Sie Behandlungsmethoden in der nachhaltigen Aquakultur von Dr. Thomas Meinelt mehr über Hygiene und Prophylaxe in der Fischhaltung lernen: Versuchstierkunde-Basiskurs Fisch BK-K22-04 21. – 23. Februar 2022 BK-K22-05 26. – 28. September 2022 Weitere Informationen und die Möglichkeit zur Anmeldung finden Sie unter: www.berliner-kompaktkurse.de
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