LABOR-automation - Transkript

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LABOR-automation - Transkript
Februar 2022

                               LABOR-
                                 automation
© zorazhuang/istockphoto.com
LABOR-automation - Transkript
LABOR-automation - Transkript
|transkript 1.2022                                                                                   Automation laborwelt. I 81

                                        · Automation ·
                                · Mehr Daten durch Automation ·
                     · Interview: Dr. René Hägerling, Charité/BIH Berlin ·
                         · Lebende Zellen markierungsfrei anreichern ·
             · Expertenkommentar: Verbessertes RNA-Profiling mit Ladder-Seq ·
                                     · Klonalität garantiert ·
                                    · Präzise auf den Punkt ·

                                               14,4
OMICS                                                                                      COVID-19

Zellen sehen                                                                               Virus-RNA automatisch
ohne Mikroskop                                                                             aufspüren
Durch Kombination der Einzelzell-                                                          Die Qiagen N.V. hat nach eigenen
sequenzierung mit der Information,                                                         Worten „mehr als 35“ automatisierte
wo genau in Darm- und Hirngewebe                Mrd. US-Dollar Umsatz machten              QIAcuity-Instrumente an die US-ame-
Transkripte exprimiert werden (spatial           2020 die Anbieter zellbasierter           rikanische Regierung geliefer. Die mit
transcriptomics) ist es EMBL-Forschern         Assays. Die Zunahme an Biologika            Nanoplatten arbeitenden automatischen
um Oliver Stegle erstmals geglückt,           beschert bis 2025 ein Wachstum auf           quantitativen PCR-Systeme sollen eine
mit mikroskopischen Techniken nicht            24,7 Mrd. US-Dollar, prognostiziert         Echtzeiterfassung der Verbreitung neuer
erfassbare subtile Unterschiede in                  marketdataforecast.com.                SARS-CoV-2-Varianten in Abwasser-
Zellen des gleichen Zelltyps und ihren                                                     proben und damit frühzeitige Eindäm-
Interaktionen zu detektieren. Ihr Tool                                                     mungsmaßnahmen lokaler Ausbrüche
cell2location wollen sie zur in-situ-                                                      ermöglichen..
Zellkartierung einsetzen (Nat. Biotech.,
                                              KÜNSTLICHE INTELLIGENZ
doi: 10.1038/s41587-021-01139-4)..
                                                                                           GENTHER APIE
                                              KI – bedeutendster
PROTEOMICS                                    F&E-InnovationsTreiber                       Bayer investiert
                                                                                           in Cellino Bio
Massenspektrometrie-                          Die künstliche Intelligenz (KI) wird im
Automation                                    Jahr 2022 den größten Einfluss auf die       Leaps by Bayer steckt 80 Mio. US-Dollar
                                              Arzneimittelentwicklung haben. Mit 40%       in die auf die automatisierte Herstellung,
Die Martinsrieder PreOmics GmbH hat           Zustimmung in einer von Global Data          Differenzierung und Skalierung von
Mitte Januar im Rahmen einer Serie B-         durchgeführten Befragung liegt KI als neue   autologen Stammtherapien für die re-
Finanzierung 13,5 Mio. Euro vom Massen-       Kerntechnologie zur Beschleunigung des       generative Medizin spezialisierte Cellino
spektrometrie-Spezialisten Bruker Corp.       Drug Screenings und Prozessdesigns um        Biotech Inc. Cellinos Fertigungsplattform
erhalten. Das Geld steckt das Start-up in     16% vor dem Zweitplazierten Big Data.        in Kassettenform kann laut CEO Nabiha
die Forschung, Entwicklung und Vermark-       Als Grund nennen die Befragten Entschei-     Saklayen tausende Zellen zugleich
tung von Automations- und Probenvorbe-        der die signifikante Beschleunigung der      labelfrei markieren, sortieren, reprogram-
reitungslösungen für biologische Proben. .   Leadidentifikation und Entwicklung..        mieren und vermehren..
LABOR-automation - Transkript
82 I Laborwelt. Automation                                                                                |transkript 1.2022

Besser durch
KI-Automation
Wer Geld und Rechenressourcen hat, der rüstet sich für die
neue Ära der Hochgeschwindigkeitsforschung in den Life Sciences.
Um bahnbrechende Zufallsentdeckungen und Publikationen
wahrscheinlicher zu machen, zählt die Kombination von
Automation und Mustererkennung immer mehr.

„Durchbruch das Jahres 2021“ nennt das    miert hat, ließ vergangenen Herbst Struk-   niger Monate ermittelten 350.000 Pro-
Fachmagazin Science die von der briti-    turbiologen vor Respekt beben: Mit einer    teinstrukturen korrekt voraus. Zwar
schen Alphabet-Tochter Deepmind per       Genauigkeit 2,4 Ångstrøm sagte das auf      bleiben Proteinkomplexe, Protein-Tar-
Algorithmen automatisierte Protein-       Basis bereits ermittelter Proteinstruktu-   get-Wechselwirkungen und neue, un-
strukturvorhersage – und stellt sie auf   ren selbstlernende Programm Alpha-          bekannte Faltungen noch außen vor.
eine Stufe mit der Entdeckung der Gen-    fold2 (und der akademische Konkurrent       Der von Patentlaufzeiten getriebenen
schere CRISPR-Cas-9. Was das Team um      RoseTTAFold) aus der schieren Sequenz       Biopharmaindustrie genügt jedoch die
Deepmind-Chef John Jumper program-        der Aminosäuren 92% der binnen we-          demonstrierte Präzision der Ångstrøm-

                                                                                                                          TG
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|transkript 1.2022                                               Lernen Sie das     .Automation. LaborwelTI 83

                                                                                                        EMnetik-System kennen
                                      genauen Strukturvorhersagen, um bereits heute von einer           PCR-Aufreinigung und
                                      neuen Präzisionsmedizin zu träumen: Struktur bestimmt
                                      Funktion.
                                                                                                        Plasmidvorbereitung – vereinfacht

                                      Breite Anwendung
                                      Doch nicht nur computermodellierte Wirkstoffe und Tar-
                                      gets sind durch künstliche Intelligenz in den Fokus gerückt.
                                      Auch die durch kleinste Änderungen in Bioprozessen aus der
                                      Balance geratende Proteinmikroheterogenitäten, die ganze
                                      Chargen ruinieren, könnten mit Hilfe der Mustererkennung
                                      optimiert werden und sich künftig besser kontrollieren lassen.
                                         Ein hochaktuelles Feld des KI-Einsatzes ist die grassierende
                                      Corona-Pandemie, genauer gesagt: das frühzeitige Erkennen
                                      kritischer Virusvarianten, die Impfstoffentwicklern, die auf
                                      immer dasselbe Zielantigen schießen und damit den Selek-
                                      tionsdruck erhöhen – Anfang Januar gab es pro Woche rund
                                      10.000 neue Sequenzvarianten – einen wichtigen Zeitgewinn
                                      beim Design angepasster mRNA-Vakzine bringen.
                                         Anfang Januar gaben Deutschland Biotech-Firma Nr. 1,
                                      die Mainzer Biontech SE, und der britische KI-Spezialist
                                      InstaDeep Ltd offiziell die Entwicklung einer Berechnungs-         Der Antrieb für Ihre Forschung.
                                      methode bekannt, die die weltweit verfügbaren Sequenzi-
                                      erungsdaten von SARS-CoV-2 durchmustert und mit auto-              Beschleunigen Sie ihrer
                                      matisierten Strukturvorhersagen des viralen Spikeproteins
                                      koppelt. Nach Einspeisen der genomischen RNA-Sequenz
                                                                                                         wissenschaftlichen Antworten
                                      identifizierte die Methode von die Hochrisikovariante Omi-         und die Nukleinsäureaufreinigung.
                                      kron binnen einer Woche als bedenklich, fühere Varianten
                                      sogar binnen eines Tages. Eine Omikron-spezifische Vakzine
                                      könne deshalb bereits Ende der ersten Quartals bereits zur
                                      Verfügung stehen, hieß es.

                                      Neue Anwendungen
                                      Aber auch auf biotechnologischer Seite wird tüchtig optimiert,
                                                                                                          Schneller      Berührungs-                                             Hoch-
                                      wie das Ladder-Seq-Verfahren zeigt (vgl. S. 90). Die üblichen
                                                                                                                           punkte                                              empfindliche
                                      Sequenzierungs-bedingten Lücken in RNA-Genomen ent-
                                                                                                                                                                               magnetische
                                      fallen durch die neue Methode.
                                                                                                                                                                                 Beads
                                        Fortschritte bei der automatisisierten KI-gestützten Analyse
                                      von Gewebe-Biopsien mittels 3D-Lichtblatt-Mikroskopie run-
                                      den das Anwendungsspektrum der prioritär EU-geförderten
                                      KIotechnologie ab. Ob man mit den USA und China mithalten
                                      kann, wo KI-Expertise nicht erst entstehen muss oder an der
                                      Finanzierung scheitert, wird sich zeigen.       .          TG

                                                                                                         Verbessertes       Geführte                                                Kompakt
                                                                                                           Mischen         Benutzer-                                                  und
                                                                                                         und Trennen       oberfläche                                                 leicht
                                                                                                          der Beads
Bildnachweis: Karen Arnott_EMBL-EBI

                                                                                                         Weitere Informationen: becls.co/emnetik24

                                                                                                                        Not intended or validated for use in the diagnosis of disease or other conditions.
                                      In rasendem Tempo entschlüsselt Deepmind die 3D-Strukturen                        © 2022 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. Beckman Coulter, the stylized logo and the
                                                                                                                        Beckman Coulter product and service names mentioned herein are trademarks or registered
                                      sphärischer Proteine.                                                             trademarks of Beckman Coulter, Inc. in the United States and other countries.

                                                                                                                        For Beckman Coulter’s worldwide office locations and phone numbers, please visit
                                                                                                                        “Contact Us” at beckman.com
                                                                                                                        EU0122Geno-EMnetikSystem-PrintedAd-GER
LABOR-automation - Transkript
84 I laborwelt. ADVERtORIAL                                                                                         |transkript 1.2022

Mit KI Varianten
interpretieren
NOSTOS GENOMICS Das Berliner Unternehmen arbeitet daran,
das Leben von Menschen mit genetischen Erkrankungen zu verbessern.
Mit der Nutzung von modernster KI zur Varianteninterpretation unterstützt
es Labore dabei, Diagnosen zu beschleunigen und zu verbessern.

Mehr als 300 Millionen Menschen weltweit
sind von seltenen genetischen Krankhei-
ten betroffen. Patienten, die unter solchen
Krankheiten leiden, müssen häufig unzähli-
ge Arztbesuche, -überweisungen und Tests
über sich ergehen lassen, um eine Diagno-
se zu erhalten. Im Durchschnitt wird diese
erst nach mehr als sieben Jahren nach dem
Auftreten erster Symptome gestellt, was zu
einer schlechten medizinischen Versorgung
und hohen Kosten für unsere Gesundheits-
systeme führt. Genetische Tests können die
Dauer und die Folgekosten dieser diagnos-
tischen Odyssee verkürzen, indem sie die
krankheitsverursachenden Mutationen in
der DNA der Patienten identifizieren.

Komplexe Varianteninterpretation              Genomics ermöglicht es, diese Komple-          umfassenden Berichten und Exporten der
Die Entwicklung moderner DNA-Sequenzie­       xität deutlich zu verringern. Durch die        Ergebnisse. Das Berliner Unternehmen
rungsmethoden, wie die Exom-Sequenzie-        patentierten Lernalgorithmen zur Varian-       bietet zudem eine API-Schnittstelle an, um
rung, hat den Engpass in den vergangenen      tenklassifizierung und -priorisierung kann     seine Lösung in bestehende Prozesse und
Jahren weg von der Sequenzierung hin zur      die Plattform AION Exom-Tests in weniger       Software nahtlos einzubinden. Die GDPR-
Dateninterpretation verlagert. In der Regel   als zwei Minuten analysieren, während          konforme und CE-IVD-zertifizierte Platt-
werden bei der Exom-Sequenzierung eines       gleichzeitig die Anzahl der gelösten Fälle     form wird bereits von namhaften Laboren
Patienten bis zu hunderttausend Varianten     steigt. Modernste künstliche Intelligenz       in Deutschland und Europa genutzt. Nostos
in der DNA identifiziert, obwohl nur einige   (KI), kombiniert mit einer laufend aktuali-    Genomics setzt zudem auf eine fortlaufende
wenige für das jeweilige Krankheitsbild von   sierten Wissensdatenbank, übertrifft dabei     Verbesserung und Validierung, zum Beispiel
Bedeutung sind. Der Prozess der Varianten-    die r­ egelbasierte ACMG-Klassifikation um     mithilfe von Daten des 100.000-Genome-
interpretation ist daher maßgeblich für die   mehr als 50% und liefert alle nötigen Infor-   Projekts aus Großbritannien.
Aussagekraft von Gentests zur Diagnose        mationen, um die Ergebnisse unabhängig
von Patienten, stellt aber insbesondere bei   verifizieren zu können (siehe Grafik).
der Exom- und Genom-Sequenzierung La-                                                        Kontakt
                                                                                                                                          Bildnachweis: Nostos Genomics

bore aufgrund der Komplexität häufig vor      AION als Lösung für Labore                     Marcus Rüsenberg
große Herausforderungen.                      AION unterstützt Labore dabei, große Teile     Business Development Manager DACH
                                              ihrer Varianteninterpretation zu beschleuni-   Nostos Genomics GmbH
Phänotypbasierte Priorisierung                gen, sich auf komplexe Fälle zu konzentrie-    +49 30 439738090
Die phänotypbasierte Interpretationsplatt-    ren und Geschäftsabläufe zu verbessern.        info@nostos-genomics.com
form AION des Unternehmens Nostos             Die Plattform ermöglicht die Erstellung von    https://www.nostos-genomics.com/
LABOR-automation - Transkript
|transkript 1.2022                                                                                               Interview LABORWELT. I 85

        Automatisierte
        Histologie in 3D
         Wissenschaftler des Berlin Institute of Health der Charité haben ein
         automatisiertes Verfahren zur KI-gestützten 3D-Analyse von Gewebe-
         biopsien entwickelt. LABORWELT sprach mit Dr. Dr. René Hägerling
         und Dr. Fabian Mohr, die die Kommerzialisierung derzeit vorbereiten.

         LABORWELT. Was war Ihre Motivation,                     vor allem im Bereich der Vaskularisie-          des gesamten Gewebes in zellulärer Auf-
         ein automatisiertes Verfahren zur 3D-Ana-               rung. Im Rahmen unserer Forschungstä-           lösung gesucht. Vor knapp zehn Jahren
         lyse von Gewebeschnitten auf Basis der                  tigkeiten an Tiermodellen hatten wir er-        kamen die ersten Lichtblattmikroskopie-
         Lichtblattmikroskopie zu entwickeln?                    kannt, dass Zelltypen und Strukturen sich       Systeme zur optischen Schnittbildgebung
                                                                 oftmals nicht durch eine zweidimensionale       großvolumiger Proben auf den Markt und
         Hägerling. Wir beschäftigen uns seit                    histologische Analyse adäquat abbilden          wir haben schnell das Potential dieses
         mehr als zehn Jahren mit der räumlichen                 lassen. Deshalb haben wir nach Lösungen         Verfahrens für unsere Fragestellung er-
         Darstellung von Gewebearchitekturen,                    für eine drei­dimensionale Visualisierung       kannt und zur räumlichen Visualisierung

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LABOR-automation - Transkript
86 I LABORWELT. INTERVIEW                                                                                           |transkript 1.2022

ganzer Maus­organe und Mausembryonen                                                        skalierbare 3D-Histologie-Plattform wer-
verwendet. Wir hatten die Möglichkeit,                                                      den, welche eine probenerhaltende räumli-
diese Technologie von Anfang an zu be-                                                      che Analyse von Biomarkern auf zellulärer
gleiten und die Lichtblattmikroskopie und                                                   Ebene, zum Beispiel zur Darstellung der
Probenaufbereitung weiter- und mitzu-                                                       Tumorheterogenität, ermöglicht.
entwickeln. Im Vergleich zur konventio-                                                       Wir gehen davon aus, dass wir damit
nellen Histologie haben wir früh erkannt,                                                   auch gerade bei Patientenproben mit
dass unser Workflow aus Probenvorbe-                                                        wenig Material, beispielsweise bei Fein-
reitung, Bildgebung und anschließender                                                      nadelbiopsien im Rahmen der Tumor­
3D-Rekonstruktion für die Histopatho-                                                       diagnostik, einen großen Mehrwert durch
logie relevant ist und essentielle Vortei-         DR. DR. RENÉ HÄGERLING                   unsere Technologie bieten können. Da
le gegenüber der klassischen Histologie               Arzt / Forschungsgruppenleiter        mit unserem Verfahren der ‚no-touch-
bietet.                                              Charité – Universitätsmedizin Berlin   no-waste‘-3D-Histologie eine moleku-
   Im Rahmen des EXIST-Forschungs-                                                          lardiagnostische sowie 3D-histologische
transfers haben wir deshalb unseren Fo-                                                     Untersuchung der gleichen Probe nachei-
kus auf die Translation der Technologie in                                                  nander durchgeführt werden kann, umge-
die Routinediagnostik gelegt und etablie-                                                   hen wir das bekannte Dilemma, vor dem
ren alle gängigen Methoden aus der kon-                                                     der Pathologe oftmals bei kleinen Proben­
ventionellen Histologie auf unserer neuen                                                   volumina steht – nämlich ob Molekular­
Plattform.                                                                                  diagnostik oder Histologie durchgeführt
                                                                                            werden soll.
LABORWELT. Wie genau arbeitet Ihr Ver-
fahren und die dafür erforderliche Färbe-                                                   LABORWELT. Wo liegen Herausforde-
methodik?                                                                                   rungen oder Limitationen, zum Beispiel bei
                                                                                            der Gewebe­präparation?
Hägerling. Um Biopsien und Gewebe­                     DR. FABIAN MOHR
proben als Ganzes zu färben und auf-                          Co-Projektleiter              Hägerling. Konventionelle Färbeverfah-
zuarbeiten, können die klassischen His-             Charité – Universitätsmedizin Berlin    ren aus der Pathologie liegen vor allem im
tologieverfahren und Färbereagenzien                                                        Bereich des visuellen Spektrums des Men-
einschließlich IgG-Antikörper nicht ver-                                                    schen und besitzen in den meisten Fällen
wendet werden. Daher haben wir neuar-         gesamte Turn-Around-Time von Proben-          keine Fähigkeit zur Fluoreszenz; sie kön-
tige Färbemethoden basierend auf Flu-         eingang bis Analyse um etwa 40%.              nen deshalb nicht im Lichtblattmikroskop
oreszenzfarbstoffen sowie proprietären            Im Lichtblattmikroskop werden nun         visualisiert werden. Aus diesem Grund
Nanobodies entwickelt. Nanobodies sind        ­einige tausend digitale, optische Schnitte   entwickeln wir proprietäre fluoreszierende
eine besondere Klasse von Antikörpern,         erzeugt, die die gesamte Probe mit zel-      Farbstoffe sowie Antikörper-Moleküle, die
die aufgrund ihrer geringen Größe sehr         lulärer Auflösung abdecken. Wir können       die Färbung der gesamten Probe in kür-
schnell in eine Gesamtgewebeprobe ein-        dabei bis zu sechs Zielmoleküle von Inter-    zester Zeit ermöglichen. Zusätzlich entsteht
dringen können. Insgesamt können wir           esse parallel anfärben und diese räumlich    bei der Analyse eine sehr große Datenmen-
durch die Kombination von fluoreszieren-       in 3D, aber auch auf Einzelschnittebene      ge für eine individuelle Probe. Wir arbeiten
den Farbstoffen mit der Nanobody-Tech-         quantifizieren. Da die Anzahl an Schnitten   derzeit an neuen Algorithmen, die die Ver-
nologie das Gewebe auch für komplexe           sehr groß ist, entwickeln wir derzeit auf    arbeitung zeitnah für die Befundung durch
Analysen innerhalb kürzester Zeit anfär-       künstlicher Intelligenz basierende Soft-     den Pathologen abschließen können.
ben.Im Anschluss an die Probenaufberei-        warelösungen, die eine Segmentierung,
tung und Färbung wird das Gewebe op-           Klassifizierung und Auswertung der Da-       LABORWELT. Was ist das technologi-
tisch geklärt, also durchsichtig gemacht.      ten zulassen und dem Pathologen als Ent-     sche Alleinstellungsmerkmal Ihrer anvisier-
                                                                                                                                           Bildnachweis: Charité; Charité UNiversitätsmedizin

Dieser Schritt ist essentiell, um die Probe    scheidungshilfe bei der Diagnosefindung      ten Firmengründung?
mittels des Lichtblattmikroskops optisch       zur Verfügung stehen.
zu schneiden, da ansonsten das Licht-             Bei dem optischen Schnittbildgebungs-     Mohr. Wir haben mittlerweile mehr als
blatt die Probe nicht durchdringen kann.       verfahren bleiben die Proben vollkommen      zehn Jahre Erfahrung im Bereich der
Das gesamte Verfahren der Probenvor-           erhalten, so dass Downstream-Applika­        Lichtblattmikroskopie sowie Färbeverfah-
bereitung wird nun auf einer Automati-         tionen wie DNA-Sequenzierung oder Tran-      ren gesammelt. In dieser Zeit haben wir
sierungsplattform etabliert. Dadurch eli-      skriptomik möglich sind.                     starke Partner für unsere nun anstehende
minieren wir die manuelle Arbeit an der           Auf dieser Basis wollen wir der erste     Firmengründung gewinnen können, die
Probe fast komplett, und reduzieren die        ­Anbieter für eine vollautomatisierte und    uns bei unserem Ziel unterstützen, der
LABOR-automation - Transkript
|transkript 1.2022                                                                                   Interview LABORWELT. I 87

erste Anbieter für eine vollautomatisierte und skalierbare 3D-
Histologie-Plattform zu werden. Unser Alleinstellungsmerkmal
liegt in der Einzigartigkeit des Verfahrens und der Entwicklung
einer End-to-end-Lösung für die 3D-Histologie. Durch Kombi-
nation unserer Färbeverfahren mit einer Vollautomatisierung
der Proben­vorbereitung sowie der KI-gestützten Auswertung
können wir nun erstmals den gesamten Prozess automatisiert
abbilden. Dies konnte bisher noch kein Anbieter realisieren.
Darüber hinaus ermöglicht unser Verfahren erstmals die Ana-
lyse der kompletten Gewebeproben auf Abnormalitäten in einer        NOW TAKE AN EASIER, FASTER AND
bisher nicht zur Verfügung stehenden Auflösung. Man kann dies       MORE RELIABLE ROUTE.
in etwa mit dem Übergang vom Röntgenbild auf die CT/MRT             No stops between normalization and pooling steps.
-Technologie vergleichen.Zudem ermöglicht unser Ansatz im An-
schluss an die Visualisierung eine vollumfängliche molekularge-
netische Analyse auf NGS-Basis, da das Probenmaterial nicht
wie in der konventionellen Histologie verbraucht wird. Aufgrund
dieser Einzigartigkeit nennen wir das Verfahren auch ‚no-touch-
no-waste‘-Pathologie.

LABORWELT. Wie weit sind Sie derzeit mit der Validierung Ihres
Verfahrens?

Mohr. Bereits im Jahr 2020 konnten wir gemeinsam mit unse-          The Echo Liquid Handler cuts up to 97%
ren Kollaborationspartnern Prof. Bruno Märkl und Prof. Ralf         of the time you‘re spending on your NGS journey.
Huss (Institut für Pathologie, Universitätsklinikum Augsburg)       How? The Echo liquid handler can simultaneously
im Bereich von Routineproben einen Proof-of-Concept in ei-          normalize and pool your picks from your normalization
nem pathologischen Labor durchführen. Basierend auf diesen          picklist in one step. Your libraries are processed
                                                                    faster by „travelling at the speed of sound“.
Erkenntnissen haben wir das Verfahren weitergehend optimiert.
Gegenwärtig konzentrieren sich unsere Arbeiten stark auf unsere
Automatisierungstechnologie, Algorithmenentwicklung sowie die
Durchführung von ersten klinischen S­ tudien im Bereich des Lun-
gen- und M
         ­ agenkarzinoms.

LABORWELT. Wo sehen Sie die Zielgruppe und wie groß ist
etwa der Zielmarkt?

Mohr. Prinzipiell ist unsere Plattformtechnologie für alle Patho-
logie-Labore mit einem gewissen Probendurchsatz interessant.        That means a normalization and pooling process
Die Probenmenge in der Pathologie steigt kontinuierlich und         which takes up to 2.5 hours with traditional transfer
die Disziplin unterliegt parallel auch ­einem Fachkräftemangel.     methods will only take 4 minutes with on an
Beide Probleme versuchen wir mit unserer Automatisierungs-          Echo 525 Liquid Handler!
plattform sowie reduzierter Turn-Around-Time des kompletten
Prozesses von Probenvorbereitung bis Analyse zu lösen.

LABORWELT. Welche Schritte planen Sie in diesem Jahr?

Mohr. Unser Ziel ist es, in diesem Jahr den kompletten Prozess
von Anfang bis Ende in einem Showcase präsentieren zu können.
Darüber hinaus planen wir die ersten klinischen Studien im Be-
reich Lungen- sowie Magenkarzinom, um das erweiterte diag-
nostische Potential der Methodik darstellen zu können. Daneben                         Echo 525 Series Acoustic Liquid Handlers are not intended for use in the diagnosis of disease or
planen wir die Ausgründung unserer Firma sowie den Abschluss                           other conditions.
                                                                                       © 2022 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. Beckman Coulter, the stylized logo, and the
einer ersten Finanzierungsrunde für die weitere Entwicklung un-                        Beckman Coulter product and service marks mentioned herein are trademarks or registered
serer Plattformtechnologie.                                 TG                        trademarks of Beckman Coulter, Inc. in the United States and other countries.

                                                                                       For Beckman Coulter’s worldwide office locations and phone numbers, please visit
                                                                                       “Contact Us” at beckman.com
                                                                                       EU-LiqH-2201-LW-Ad
LABOR-automation - Transkript
88 I lABORWELT. Automation                                                                                           |transkript 1.2022

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                                                                                                des Flüssigkeitsvolumens bis hin zum
                                                                                                Boden des Wells dokumentieren und
                                                                                                so einen unstrittigen Nachweis der
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                                                                                                   Eine 384-Well-Platte kann in weni-
                                                                                                ger als 30 Minuten mit je einer einzel-
                                                                                                nen Zelle pro Well gefüllt und gleich-
                                                                                                zeitig per Bildnachweis dokumentiert
                                                                                                werden. Dies stellt einen signifikanten
                                                                                                Zeitgewinn im Vergleich zu bisher üb-
                                                                                                lichen Methoden dar.

                                                                                                Smarte Lösungen
Cytenas UP.SIGHT™: Der ultimate All-in-One-Einzelzelldispensierer für Zelllinienentwicklungs-   Die in das Gerät integrierte Software
Workflows                                                                                       analysiert die Zellmorphologie, um
                                                                                                einzelne Zellen nach festgelegten Pa-
Das Hightech-Start-up-Unternehmen                   Der UP.SIGHT-Dispensierer beschleu-         rametern wie Größe, Rundheit und so-
­C ytena aus Freiburg, Teil der Bico-               nigt und vereinfacht die Arbeitsabläufe     gar Fluoreszenzintensität zu isolieren.
 Gruppe, hat es sich zur Aufgabe ge-                in der Zelllinienentwicklung, indem         Sie ist mit einer Vielzahl von Zellen
 macht, automatisierte Laborgeräte zu               arbeitsintensive und zeitaufwendige         kompatibel. Darüber hinaus eliminie-
 entwickeln, welche die Untersuchung                Prozessschritte automatisiert werden.       ren Einweg-Dispensierkartuschen das
 und Distribution von mikroskopisch klei-                                                       Risiko einer Kreuzkontamination und
 nen biologischen Entitäten ermöglichen.            Einfache Dokumentation                      verbessern die Lebensfähigkeit der
 Der von Cytena entwickelte automati-               Cytena hat seine hocheffiziente und         Zellen. Die Verfolgung des Wachstums
 sierungsfähige Einzelzell-Dispensierer             schonende Einzelzell-Dispensier-            von Kolonien wird durch einen inte-
 UP.SIGHT™ verwendet eine auf Optik                 technologie mit einem schnellen und         grierten Imager erleichtert.
 und Mikrofluidik basierende Technolo-              innovativen Imaging-System kombi-             Der UP.SIGHT-Dispensierer wird
 gie zur Dispensierung einzelner Zellen.            niert. Die Komplettlösung ermöglicht        automatisierungsbereit ausgeliefert,
   Während handelsübliche Labor-                    durch zwei unabhängige optische             wobei C ­ ytenas erfahrene Anwen-
 einrichtungen separate Einzelzell-                 Komponenten mehrere bildbasierte            dungsspezialisten einen umfassen-
 dispensierer, Zentrifugen und Well-                Nachweise der Einzelzellablage zur          den Service bieten, um die ultimative
 plate-Imager erfordern, ermöglicht                 Absicherung der Klonaltität mit einer       Verbesserung der kundenspezifischen
                                                                                                                                           Bildnachweis: Cytena

 der UP.SIGHT die Automatisierung                   Klonalitätswahrscheinlichkeit von           Zelllinienentwicklungs-Workflows zu
 des gesamten Prozesses in nur einem                mehr als 99,99%. Das Resultat sind          gewährleisten.
 Gerät und spart somit erheblich Zeit,              qualitativ hochwertige Bilder, die die        Weitere Informationen dazu finden
 Platz und Kosten.                                  Reise der einzelnen Zelle durch die         sich unter www.cytena.com..
Das neue Biomek NGeniuS
Library Prep System

Inspiriert von Beckman Coulters mehr als 30-jährigen Erfahrung in der smarten
Laborautomatisierung, stellt das Biomek NGeniuS System einen Evolutionssprung
bei den NGS-Probenvorbereitungssystemen dar.
Mit seiner Technologie zur Fehlerreduzierung, Benutzerfreundlichkeit, reduziertem
Arbeitsaufwand und Flexibilität, setzt es neue Standards bei den NGS-Pipettierrobotern.

Flexible Anwendungsauswahl: Als Teil unseres umfassenden Ser-                 Fehlerreduzierte Geräteeinstellung: Hochentwickelte optische
vicevertrags bietet das Biomek NGeniuS System eine breite Pa-                 Analyseverfahren in Kombination mit dem Head-up-Display ge-
lette an Methoden von verschiedenen Reagenzienherstellern,                    ben Ihnen Echtzeit-Feedback zur Platzierung der Laborgeräte,
einschließlich DNA-Sequenzierung (ganzes Genom, gezielte Re-                  wodurch Fehler beim Laden praktisch ausgeschlossen werden.
Sequenzierung (Amplicon & Hybridization Capture)) und RNA-Se-                 Jetzt können auch weniger erfahrene Bediener komplexe Anwen-
quenzierung (mRNA, Gesamt-RNA und targeted RNA (Amplicon &                    dungen sicher durchführen.
Hybridization Capture))
                                                                              Fernüberwachung des Systems*: Die mehrfarbige, mustercodier-
Anwendungssteuerung: Kontrollieren sie den Benutzerzugang zu                  te 360°-Lichtleiste zeigt den aktuellen Gerätestatus an. Nicht in
Anwendungen mit einem einfachen Autorisierungsprozess (falls                  Sichtweite? Mit der Biomek NGeniuS Portal Software können Sie
erforderlich). Stellen sie sicher, dass nur autorisierte Benutzer Zu-         den Systemstatus von jedem Computer aus überwachen.
griff auf nicht laborvalidierte Anwendungen haben.
                                                                              Vereinfachte Probenverarbeitung: Das multifunktionale Reak-
Batch-Setup von überall aus*: Mit der Biomek NGeniuS Portal Soft-             tionsgefäß (RV) vereint drei Verbrauchsmaterialien in einem, was
ware können sie Ihren Batch-Lauf einrichten, wann und wo es für               den Zeitaufwand für die Verwaltung des Laborinventars reduziert:
sie am bequemsten ist. Egal, ob sie von zu Hause, vom Büro oder               - Probeneingabeplatte
vom Labortisch aus arbeiten, können sie Chargengrößen von 4-24                - Platte für thermische Zyklen
Proben programmieren.                                                         - Clean-up-Platte
                                                                              Verfolgen Sie Ihre Proben - mit bis zu 100 Millionen eindeutigen
Reagenzienvorbereitung leicht gemacht: Sobald sie die Anwen-                  RV-Barcodes - während des gesamten Anwendungslaufs.
dung ausgewählt und die Anzahl der Proben eingegeben haben,
erstellt die Biomek NGeniuS-Software eine Arbeitshilfe, die Fol-              * Erfordert einen Computer mit Google Chrome oder Microsoft Edge.
gendes enthält:
- Liste der für den Lauf benötigten Reagenzien
- Volumenanforderungen für jedes Reagenz
- Anweisungen zum Vorbereiten und Laden der Reagenzien
Die Arbeitshilfe spart Zeit und Mühe und gewährleistet gleichzeitig           Weitere Informationen:
die Reproduzierbarkeit der Reagenzvorbereitung.                               beckman.de/liquid-handlers/biomek-ngenius

                                          Das Biomek NGeniuS Next Generation Library Prep System ist nicht für die Diagnose von Krankheiten bestimmt oder vali-
                                          diert. In Entwicklung. Leistungsmerkmale wurden noch nicht validiert.

                                          © 2022 Beckman Coulter, Inc. All rights reserved. Beckman Coulter, the stylized logo, and the Beckman Coulter product and
                                          service marks mentioned herein, including Biomek and Biomek NGeniuS, are trademarks or registered trademarks of Beckman
                                          Coulter, Inc. in the United States and other countries. All other trademarks are the property of their respective owners.

                                          For Beckman Coulter’s worldwide office locations and phone numbers, please visit “Contact Us” at beckman.com

                                          EU-GEN-2201-GIT-Art-GER
90 I laborwelt. Expertenstatement                                                                           |transkript 1.2022

genauer mit
Ladder-seq
Ein Verfahren, das hilft, die kurzen Reads, die bei der RNA-
Sequenzierung entstehen, präziser als bisher möglich zusammen-
zufügen, präsentierten unlängst Forscher um Dr. Francisca Rojas
Ringeling und Dr. Stefan Canzar von der LMU München.

Gene sind in der Lage, mehrere Tran-                                                 ziert, selbst bei großer ­Sequenziertiefe.
skript-Isoforme zu erzeugen, die wäh-                                                Long-Read-Techniken (lrRNA-seq), die
rend des prä-mRNA-Spleißens aus un-                                                  von Pacific Biosciences und Oxford
terschiedlichen Teilmengen von Exons                                                 ­Nanopore entwickelt wurden, sind in der
zusammengesetzt werden. Geschätzt                                                     Lage, RNA-Sequenzen an einem Stück
90% der menschlichen Protein-codieren-                                                zu lesen. Die Zerstückelung der RNA
den Gene besitzen mehrere Isoformen                                                   und das anschließende Zusammenset-
und erzeugen so eine bemerkenswert                                                    zen fallen weg, was die rechnergestützte
komplexe Menge von Transkripten, das                                                  Auswertung der erzeugten Daten gegen-
Transkriptom.                                                                         über Short-Read-Methoden signifikant
  Die Short-Read-RNA-Sequenzierung               DR. STEFAN CANZAR                    vereinfacht. Trotzdem hat eine deutlich
(srRNA-seq) ist eine leistungsstarke               Gruppenleiter, Genzentrum          höhere Fehlerquote der Long Reads zur
und kostengünstige Methode, um das                      München, LMU                  Entwicklung spezialisierter Software-
Transkriptom zu erfassen. Den Infor-                                                  werkzeuge geführt, die versuchen,

                                                                                                                                  Bildnachweis: LMU München
mationsverlust, der mit der notwendi-    ders Transkripten komplexer Gene, die        aus fehlerbehafteten Reads korrekte
gen Fragmentierung der Transkripte       durch alternatives Spleißen mehrere          Volllängen-Transkripte zu extrahieren.
einhergeht, können rechnergestützte      Teilsequenzen teilen, oft nicht eindeutig    Dabei können verschiedene Strategien
Methoden jedoch nur teilweise wieder-    zugeordnet werden und werden deshalb         zu sehr unterschiedlichen Ergebnissen
herstellen. Kurze Reads können beson-    inkorrekt rekons­t ruiert oder quantifi-     führen. Außerdem erzielen lrRNA-seq-
|transkript 1.2022
                            |transkrip

                                                                          noms konnte sie 78% mehr Transkripte
                                                                          korrekt zusammensetzen. Die präzisere
                                                                          Rekonstruktion des Transkriptoms von
                                                                          experimentellen Ladder-seq-Daten hat
                                                                          es zudem ermöglicht, 40% mehr Gene
                                                                          mit signifikanten Veränderungen der
                                                                          Transkript-Komposition zu entdecken als
                                                                          mit konventioneller srRNA-seq möglich.
                                                                            In der Proof-of-Concept-Implementie-
                                                                         rung von Ladder-seq wurde die mRNA
                                   DR. FRANCISCA ROJAS                   mithilfe der Agarose-Gelelektropho-
                                        RINGELING                        rese nach ihrer Länge getrennt. Die
                                        Post-doc, Canzar Lab             Gelelektro­phorese ist einfach, kosten-
                                                                         günstig und bedarf keiner zusätzlichen
                            Technologien einen deutlich niedrige-        experimentellen Ausstattung. Die mR-
                            ren Durchsatz und weisen folglich eine       NA-Trennung nach Länge kann jedoch
                            sehr viel kleinere Zahl von Genen und        auch durch andere Technologien erzielt
                            Transkripten als srRNA-seq in den Zellen     werden, wie etwa die reversible Fest-
                            nach. Die niedrigere Sequenziertiefe er-     phasen-Immobilisierung, die Kapillar-
                            schwert darüber hinaus den statistischen     elektrophorese oder die Ionenpaar-Um-
                            Vergleich von Transkript-Häufigkeiten        kehrphasen-HPLC. Diese Technologien
                            zwischen verschiedenen biologischen          trennen die Moleküle mit unterschied-
                            Bedingungen. Aktuelle Studien kom-           licher Präzision und unterscheiden sich
                            binieren deshalb Long-Read häufig mit        in den anfallenden Kosten sowie dem
                            Hochdurchsatz-Short-Read-RNA-seq             experimentellen Aufwand.
                            oder beschränken die vergleichende              Die Anzahl der Längenbereiche, in
                            Analyse auf die Berechnung der x-fachen      die die mRNA-Moleküle aufgeteilt wer-
                            Expressionsveränderung.                      den, kann jedem Experiment individuell
                                                                         angepasst werden. So kann eine feinere
                            Ladder-Seq – ein neues Tool                  Aufteilung die effektive Komplexität des
                            Ladder-seq ist die konzertierte Weiterent-   Transkriptoms weiter reduzieren und so
                            wicklung des srRNA-seq-Protokolls und        die rechnergestützte Identifikation von
                            seiner rechnergestützten Methoden, um        exprimierten Transkripten vereinfachen.
                            Transkripte mit bisher nicht gekannter       Andererseits können bei weniger kom-
                            Präzision identifizieren und quantifizie-    plexen Organismen schon wenige Tren-
                            ren zu können. Dabei werden mRNAs            nungen ausreichen, um eine erhebliche
                            vor ihrer Fragmentierung in einige we-       Verbesserung gegenüber konventionellem
                            nige Längenbereiche aufgeteilt. Diese        srRNA-seq zu erzielen. Ein Konfigurations-
                            experimentelle Trennung erzeugt eine         programm unterstützt den Ladder-seq-An-
                            zusätzliche Informationsebene, die ent-      wender bei der Auswahl einer möglichst
                            fernte Teile einer RNA – ähnlich einem       effektiven Aufteilung für sein Experiment.
                            Long Read – verknüpft, selbst wenn diese        Ladder-seq erfordert nur eine gering-
                            nicht von einem Read überspannt werden.      fügige Anpassung des Standard-Short-
                            Rechnergestützte Methoden können diese       Read RNA-seq-Protokolls und kann
                            Verknüpfung dann nutzen, um Transkripte      durch vorgefertigte Workflow-Vorla-
                            zu identifizieren, die für konventionelle    gen von einer Fülle von existierenden
                            Methoden unsichtbar sind.                    ­Methoden für die konventionelle srRNA-
                              In Simulationen konnte spezialisierte       seq-Analyse profitieren. Zusammen mit
                            Ladder-seq-Software einen bis zu 30%          maßgeschneiderten rechnergestützten
Bildnachweis: LMU München

                            größeren Anteil der Transkripte kom-          Methoden ermöglicht es Ladder-seq
                            plexer Gene rekonstruieren als srRNA-         Forschungseinrichtungen, bestehende
                            seq und machte dabei deutlich weniger         Limitierungen von srRNA-seq hin zu
                            Fehler. Bei der De novo-Assemblierung         hochpräziser, quantitativer Transkrip-
                            ohne Verwendung eines Referenzge-             tomik auf Isoform-Ebene zu umgehen.•
92 I Laborwelt. Automation                                                                                  |transkript 1.2022

Anreicherung
lebender Zellen
LeviCell ist die erste Plattform, die markierungsfrei lebende
Zellen anreichert und die zellulären Profile dabei nicht verändert.
Damit eignet sich das Verfahren für die Probenvorbereitung zur
Einzelzellsequenzierung und für andere Methoden, die einen
hohen Anteil an lebenden Zellen erfordern.

von Alexander Jurkowitsch, Technischer Verkauf, LevitasBio Inc.

LevitasBio hat einen innovativen An-
satz für die Anreicherung von vitalen
Zellen entwickelt, ohne dass deren
nativer Zustand verändert wird. Die
Zellen müssen dabei weder markiert
noch anderweitig manipuliert werden.
  In einem mikrof luidischen Chip
wird ein Dichtegradient erzeugt, der
die Zellsuspension in zwei Fraktionen
trennt – eine Fraktion mit vitalen Zel-
len und eine zweite Fraktion, in der
sich sterbende, tote Zellen und Zellbe-
standteile befinden. Die Auftrennung
kann mit der integrierten Gerätesoft-
ware in Echtzeit verfolgt und der Pro-
zess zeitlich optimiert werden. Für die
Probenvorbereitung sind lediglich drei
Pipettierschritte notwendig. Abhängig       so weit wie möglich unverändert erfas-     zielen, sind Analysen mit vitalen und
vom Zelltyp dauert die Auftrennung          sen. Genexpressionsprofile von Zellen      unbeschädigten Zellen eine wesent­
zwischen 5 und 25 Minuten.                  die mit der LeviCell-Plattform angerei-    liche Voraussetzung. Zumeist sind
                                            chert werden, sind gegenüber nativen       Verfahren zur Anreicherung schäd-
markierungsfrei Anreichern                  Proben gleich. Zusätzliche physiologi-     lich für die Zellen. Dadurch leidet die
In der Regel werden Zellen mit Farb-        sche Parameter wie die Teilungsrate der    biologische Relevanz, die Ergebnisse
stoffen markiert, die den natürlichen       Zellen bleiben ebenfalls unverändert.      sind nicht länger aussagekräftig.
Zustand der Zellen unerwünscht ver-         Mit der LeviCell-Technologie lassen
ändern. Zusätzlich werden die Proben        sich Zellen schnell und benutzer-          Daten von höchster Qualität
durch mechanisch belastende und zeit-       freundlich innerhalb weniger Minuten       Die schonende Auftrennung mit Hilfe
aufwendige Techniken, wie Durchfluss-       anreichern. Bei biologischen Tests gilt:   von ­L eviCell ermöglicht es Wissen-
zytometrie, oder durch magnetische          je schneller der Prozess, desto präziser   schaftlern, in der Einzelzellsequen-
Partikel beschädigt. Das LeviCell-Sys-      die Ergebnisse. Schnellere Verfahren       zierung Daten von höchster Qualität
tem ist die Alternative für eine deutlich   vermeiden unnötigen Zelltod.               zu generieren.
schonendere Anreicherung von Zellen.                                                     Zusätzlich lassen sich vitale Zellen
                                                                                                                                  Bildnachweis: LevitasBio

  Der Arbeitsablauf mit der LeviCell-       Zellen bleiben intakt                      mittels der Technologie in einfacher
Plattform beginnt mit einer nativen bio-    Die Datenanalyse ist zu einem wichti-      Weise aus dissoziiertem Gewebe, Or-
logischen Probe. Wissenschaftler wol-       gen Aspekt der Forschung geworden.         ganoiden und kryopräservierten Pro-
len die natürliche Biologie ihrer Proben    Um aussagekräftige Ergebnisse zu er-       ben gewinnen..
KOMPAKT.
                                                             FLEXIBEL.
                                                         UNKOMPLIZIERT.

VANTAstarTM
Entwickelt, um Ihnen die Assay-                                                         · Optimale Messeinstellungen durch die EDR-Technologie
Optimierung zu erleichtern: Unser                                                       · Maximale Leistung und Flexibilität dank LVF MonochromatorenTM
neuester Microplate Reader liefert                                                      · Automatische Crosstalk-Reduktion für beste Lumineszenz-Daten
best mögliche Datenqualität und                                                         · Blitzschnelle Absorptionsspektren
Flexibilität - ganz ohne zusätzliche                                                    · Budgetfreundlicher und kompakter Allrounder
Anpa
Anpassungen.                                                                            · Zuverlässigkeit - Made in German

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94 I Laborwelt. Advertorial                                                                                        |transkript 1.2022

VANTAstar multi-mode
Microplate Reader
PROBENVERARBEITUNG Für die wissenschaftliche Forschung
sind sie unerlässlich – Mikroplatten-Lesegeräte. Dabei ist die Anzahl
der Detektionsmodi und Wellenlängen, die ein Gerät messen kann,
jedoch oft limitiert. BMG LABTECH stellt eine Lösung vor.

Mikroplatten-Lesegeräte sind wichtige         Auswahl an verschiedenen Detektions-         Fluoreszenz-intensität und Lumineszenz
Forschungswerkzeuge. Normalerweise            technologien und -modi sowie einer Reihe     bis hin zu zeitaufgelöster Fluoreszenz,
ist die Anzahl der Detektionsmodi und die     an Features, die speziell dafür entwickelt   zeitaufgelöstem FRET und Fluoreszenz-
Wellenlängen, die ein Gerät messen kann,      wurden, die Durchführung von Messungen       polarisation reichen.Trotz seiner geringen
limitiert. Dies kann dazu führen, dass die    zu erleichtern und gleichzeitig genauere     Größe ist er vollgepackt mit Funktionen
Forscher Kompromisse für die Versuchs-        Ergebnisse zu liefern.                       für das Labor. Von der Grundlagenfor-
planung finden müssen.                                                                     schung bis hin zu komplexeren biowis-
   BMG L  ­ ABTECHs neuester Microplate       Geringe Größe – viele Funktionen             senschaftlichen Anwendungen baut der
Reader, der VANTAstar™, umgeht diese          Der VANTAstar Microplate Reader wur-         VANTAstar auf einer Grundlage aus drei
Probleme und bietet maximale Flexibili-       de für eine einfache Handhabung und          Detektionstechnologien auf – dem Linear
tät auf kleinstem Raum. Der Reader hat        unübertroffene Testflexibilität entwickelt   Variable Filter (LVF) Monochromator™,
verschiedene Vorteile gegenüber markt-        und kann mit Detektionsmodi ausgestat-       dem Absorptionsspektrometer und spe-
gängigen Microplate Readern mit ­einer        tet werden, die von UV/Vis-Absorption,       ziellen optischen Filtern, die spezifische
                                                                                           Wellenlängenbereiche abdecken.
                                                                                              Darüber hinaus verfügt der Reader über
                                                                                           weitere Funktionen, die die Handhabung
                                                                                           erleichtern. Eine automatische Cross-Talk-
                                                                                           Reduzierung optimiert die Datengewinnung in
                                                                                           Lumineszenz-Assays und reduziert unspezifi-
                                                                                           sche Signalüberlagerung benachbarter Wells,
                                                                                           während der schnelle Autofokus die auto-
                                                                                           matische Höhenfokussierung für komplette
                                                                                           Mikroplatten ermöglicht, um die Empfind-
                                                                                           lichkeit und Fluoreszenzsignale zu verbes-
                                                                                           sern. Zusammen mit der Enhanced Dynamic
                                                                                           Range (EDR)-Funktion, die ein Messfenster
                                                                                           von acht Dekaden Signalintensität garantiert
                                                                                           und dadurch Gain-Anpassungen überflüssig
                                                                                           macht, können so die Datenqualität e  ­ rhöht
                                                                                           und gleichzeitig manuelle Eingriffe reduziert
                                                                                           werden. Das Ergebnis: bessere Daten und
                                                                                           robustere Assays.
                                                                                              All diese Features machen den VANTA-
                                                                                                                                           Bildnachweis: BMG LABTECH

                                                                                           star zur perfekten Plattform für die Durch-
                                                                                           führung von Grundlagen-Assays. Durch
                                                                                           die Kompatibilität mit der Atmospheric
Abb. 1: Linearer Zusammenhang der Anzahl an GFP+/mcherry+ HeLas (= Transfek­tions­
effizienz) und des gemessenen mcherry-Signals, aufgenommen mit der Matrix-Scan-Funktion.   Control Unit (ACU) zur Steuerung der inter-
Zur Darstellung der Matrix-Scan wird jeweils beispielhaft ein Well pro Probe angezeigt.    nen Gasatmosphäre, Inkubationsfunktion,
|transkript 1.2022                                                                                         Advertorial Laborwelt. I 95

                            verschiedene Schütteloptionen und Bot-                                                              für die Messung aller gängigen Viabilitäts-
                            tom-Reading ist das Gerät auch ideal für                                                            Assays einzusetzen. Dank des verbauten
                            zellbasierte Anwendungen geeignet. Die                                                              LVF-Monochromators werden hierfür noch
                            hier aufgeführten Applikationen wurden                                                              nicht einmal spezielle Filter für einzelne
                            am VANTAstar gemessen und ausgewählt,                                                               Assays benötigt. Entsprechend ist jeder-
                            um dies zu verdeutlichen.                                                                           zeit die Auswahl der Methode möglich, die
                                                                                                                                für die eigenen Anforderungen am besten
                            Transfektionseffizienz                                                                              geeignet ist.
                            Transfektionsexperimente sind eine gän-                                                               Am VANTAstar-Mikroplattenlesegerät
                            gige Methode in vielen Laboren, in de-                                                              wurden drei verschiedene Viabiltäts-As-
                            nen mit Zellen gearbeitet wird. Der Erfolg      Abb. 2: Pyruvatkinase-Aktivität in der              says, jeweils in 96-Well- und 384-Well-
                                                                            Gegenwart steigender Inhibitorkonzentra-
                            einer Transfektion wird klassischerweise                                                            Formaten, ausgelesen und auf ihre De-
                                                                            tionen. Enzymaktivität wurde ohne Inhibitor
                            mittels fluoreszenter Reporter-Proteine         oder in Gegenwart von 5-25 µM Scutellarin           tektionsgrenzen untersucht (Abbildung
                            manuell an Mikroskopen ausgewertet. Der         gemessen.                                           3). Hierbei wurde deutlich, dass die
                            VANTAstar eignet sich ebenso für diese                                                              Lumineszenz- und Fluoreszenz-Me-
                            Aufgabe und bietet darüber hinaus die           verändern konnte. Die EDR-Funktion des              thoden ­CellTiter-Glo® beziehungsweise
                            Vorteile einer quantitativen, schnellen und     VANTAstars verhinderte hierbei, dass Mess-         ­alamarBlueTM für die kleinsten Zellzahlen
                            automatischen Erfassung der Transfek­           punkte außerhalb des Fensters nicht mehr            besser geeignet waren. Insgesamt konn-
                            tionseffizienz.                                 abgebildet werden konnten. Dies ist ein be-         ten in 384-Well-Mikroplatten niedrigere
                               Die Abbildung 1 zeigt die Bestimmung         deutender Vorteil gegenüber herkömmlichen           Zellzahlen nachgewiesen werden.
                            der Transfektionseffizienz am Beispiel von      Readern,denn deren Messfenster muss vor
                            HeLa-Zellen, die das Reporter-Protein           der Messung festgelegt werden.                     Weitere Applikationen
                            mcherry exprimieren. Mit steigender Trans-                                                         Zusammengenommen bieten die aufge-
                            fektionsrate war eine lineare Zunahme des       Zellviabilität                                     führten Anwendungen einen kurzen Über-
                            Fluoreszenzsignals zu beobachten, wäh-          Die Untersuchung der Zellviabilität ist eine       blick und Eindruck über das Leistungsver-
                            rend eine Hoechst-Färbung als Referenz          weitere Applikation, die in vielen Zellla-         mögen des neuen VANTAstars.
                            herangezogen wurde, um sicherzugehen,           boren eingesetzt wird. Sie kann flexibel              Mit seiner Ausstattung kann darüber hi-
                            dass alle gemessenen Wells die gleiche          angewendet werden, beispielsweise, um              naus eine Vielzahl weiterer Applikationen
                            Zellzahl enthielten. Die Well-Scan- und Bot-    zytotoxische Substanzen zu testen, oder            durchgeführt werden. Beispiele und Infor-
                            tom-Reading-Funktionen des V    ­ ANTAstars     auch um den Zustand einer Zellkultur zu            mationen dazu sind in der umfangreichen
                            ermöglichten hierbei die akkurate Bestim-       überprüfen. Zellviabiliät kann auf verschie-       Applikationsbibliothek von BMG LABTECH
                            mung der Transfektionseffizienz für die ge-     dene Weise untersucht werden, meist                zu finden.
                            testeten adhärenten Zellproben.                 durch den Nachweis der metabolischen
                                                                            Aktivität einer Zellkultur.                        Kontakt
                            Enzymkinetiken                                    Hierfür gibt es eine große Auswahl kom-          Martin Mangold
                            Assays für Proben, die über die Zeit mehr-      merziell erhältlicher Kits, die verschiedene       Application Specialist
                            mals vermessen werden, sogenannte Kineti-       Detektionsmodi nutzen.                             BMG LABTECH
                            ken, stellen eine weitere Gruppe verbreiteter     Die umfangreiche Ausstattung des                 applications@bmglabtech.com
                            Anwendungen dar. Prozesse, die über eine        VANTAstars ermöglicht es, den Reader               www.bmglabtech.com
                            bestimmte Zeit ablaufen, wie Enzym-kata-
                            lysierte Reaktionen oder Bindungsevents,
                            können so aufgenommen und bewertet
                            werden. Der VANTAstar ist ideal geeignet,
                            um die Aufnahme von Kinetiken und ihre
                            Auswertung zu unterstützen. Um dies dar-
                            zustellen, wurde die Aktivität des Enzyms
                            Pyruvatkinase in Gegenwart verschiedener
                            Konzentrationen des Inhibitors Scutellarin
                            gemessen (Abbildung 2). Durch den Ein-
Bildnachweis: BMG LABTECH

                            satz steigender Inhibitorkonzentrationen
                            nahm die Enzymaktivität Schritt für Schritt
                            ab. Daraus ergab sich ein sehr variables
                            Messfenster für die einzelnen Proben, das
                            sich außerdem sehr schnell über die Zeit        Abb. 3: Vergleich von Viabiliäts-Assay-Kits im Hinblick auf ihre Detektionslimits für HeLa-Zellen.
96 I lABORWELT. Automation                                                                                       |transkript 1.2022

Präzise auf
den Punkt
Ingenieure haben eine Zentrifuge entwickelt, die schnelldrehende
Festwinkelrotoren präzise auf den Punkt stoppt – ein bahnbrechen-
der Schritt. Damit können erstmals Applikationen, bei denen hohe
g-Werte vonnöten sind, automatisiert werden.

von Iris Sauer, Vertrieb + Marketing, Herolab GmbH Laborgeräte

                                                                                           trifugen überzeugten und überzeugen
                                                                                           durch ihre Zuverlässigkeit.

                                                                                           StopP für Festwinkelrotoren
                                                                                           Doch immer mehr Kunden fragten nach
                                                                                           höheren g-Werten (RZB) für automa-
                                                                                           tisierte Zentrifugationen. „Herolab ist
                                                                                           bekannt für innovative und flexible
                                                                                           Lösungen und reagiert, wenn immer
                                                                                           möglich, auf die Anfragen von Kunden-
                                                                                           seite“, so Geschäftsführer Erhard Knorr.
                                                                                           Die Techniker machten sich Gedanken,
                                                                                           fragten bei vielen Firmen nach Bauteilen
                                                                                           und hatten schließlich die Lösung. Jetzt
Die RobotCen von Herolab positioniert Ausschwingrotoren und Festwinkelrotoren präzise.     konnte die neue RobotCen angeboten
                                                                                           werden: Automatisierte Zentrifugation
In der Fertigungshalle dreht es sich –         der Rotor der Zentrifuge muss an einer      wahlweise mit Ausschwingrotor oder
langsam oder schnell. Zentrifugen in           definierten Position halten: Präzise auf    Festwinkelrotor.
unterschiedlichen Größen werden je-            den Punkt.                                     Die Standard-RobotCen ist eine kleine
weils mit mehreren Rotoren für ein Final                                                   Standzentrifuge mit der Möglichkeit,
Test Certificate geprüft. Das ist Routine.     StopP für Ausschwingrotoren                 Festwinkelrotoren mit Volumina bis
Aber Herolab stellt sich immer wieder          Die von Herolab entwickelte RobotCen        6 x 250 ml zu fahren (10.000 min-1,
neuen Herausforderungen. So schon in           vereint die Vorteile einer Universalzent-   16.211 x g) oder den Ausschwingrotor
der Vergangenheit, als Automatisierung         rifuge mit den besonderen Anforderun-       mit 4 x 500ml. Individuelle Konfiguratio-
in immer mehr Laboren und Produkti-            gen an die Laborautomation. Die Steue-      nen, auch größere Volumina in größeren
onsstätten in den Life Sciences langsam        rung der Zentrifuge dirigiert den Rotor     Ausführungen der RobotCen, sind je
zur Realität wurde. Der Transport von          exakt in die vordefinierte Position, eine   nach Laboranforderung möglich. Die
Proben oder das Pipettieren erfolgte           Luke im Deckel öffnet sich, der Roboter-    neueste Ausführung ist die RobotCen
nicht mehr manuell, stattdessen über-          arm übernimmt dann die automatisierte       mit Inertisierung der Zentrifugierkam-
nahmen Roboter die Aufgaben, auch in           Be- oder Entladung. Diese Technik wur-      mer. Die Stickstoffspülung wird doppelt
der Zentrifugation. Roboter be­stücken         de von mehreren Zentrifugenherstellern      überwacht, zum einen durch ein Über-
die Rotoren der Zentrifugen. Das ist der       für Ausschwingrotoren ent­w ickelt. Be-     druckkapselungssystem und zum ande-
monotone, wiederkehrende Schritt in            reits vor vielen Jahren lieferte Herolab    ren durch eine Sauerstoffsonde.
                                                                                                                                       Bildnachweis: Herolab

Hochdurchsatzlaboren oder der Pro-             die ersten Roboter-gesteuerten Zentrifu-       „Life-Sciences-Labore, vor allem auch
duktion. Aber: Der Roboter muss die            gen, auch Robotic-Zentrifugen genannt,      Labore in der pharmazeutischen For-
Position kennen, um die Proben ge-             aus dem baden-württembergischen             schung freuen sich über diese Möglich-
zielt entnehmen zu können. Das heißt,          Wiesloch an Kunden. Diese 24/7-Zen-         keiten“, resümiert Knorr. .
|transkript 1.2022                                                                         Automation Laborwelt. I 97

                                              Sequenzierung
                                              von SARS-CoV-2
                                              Die SARS-CoV-2-Pandemie hat sowohl in den Vereinigten
                                              Staaten als auch international zu erheblicher Morbidität und
                                              Mortalität geführt, was mit einer erheblichen Unterbrechung
                                              der Wirtschaftstätigkeit einherging.

                                              Dr. Jeremy Ellis, Wissenschaftlicher Leiter bei Fry Laboratories, LLC

                                              Ein flächendeckendes und wirtschaft-                                                 Leistung und die Kosteneffizienz des
                                              liches SARS-CoV-2-Screening ist ein                                                  Assays. Der Echo 525 Liquid Handler
                                              Eckpfeiler zur Wiederherstellung der                                                 unterstützt die Skalierbarkeit, Effizi-
                                              heimischen Wirtschaftsproduktion und                                                 enz und Kosteneffizienz und bietet er-
                                              der globalen Gesundheit. Fry Laborato-                                               hebliche Einsparungen, die Engpässe
                                              ries hat einen Hochdurchsatztest unter                                               reduzieren, die die Akzeptanz dieses
                                              Verwendung der Illumina MiSeq DNA-                                                   Protokolls beeinflussen können. Die Fä-
                                              Sequenzierungsplattform entwickelt                                                   higkeit des Echo Liquid Handlers, von
                                              und validiert. Mit dieser Methode kann                                               jedem Well aus in ein anderes Well zu
                                              jeder Illumina MiSeq 1.152 Proben mit                                                dispensieren, kann auf jedes öffentliche
                                              einer Laufzeit von vier Stunden pro                 Dr. Jeremy Ellis                 und private Labor übertragen werden,
        Bildnachweis: FRY Laboratories, LLC

                                              Sequenzierer verarbeiten. Ermöglicht              Wissenschaftlicher Leiter bei      das ähnliche amplikonbasierte Assays
                                              wird dies durch einen innovativen An-                Fry Laboratories, LLC           verwendet.
                                              satz, bei dem die SARS-CoV-2-Targets                                                   Während der PCR-Assemblierung
                                              N1, N2, N3 und die menschliche RNAse     ziert, barcodiert und angepasst werden.     und der Probenpooling-Schritte wur-
                                              P für die schnelle DNA-Sequenzierung     Die Zusammenstellung der komplexen          den erhebliche Zeiteinsparungen von
                                              der nächsten Generation (NGS) gleich-    und kritischen PCR-Reaktionen für           ~60 % erzielt. Die Verringerung der Re-
                                              zeitig reverse-transkribiert, amplifi-   diesen Assay ist entscheidend für die       aktionsvolumina sowie die Tatsache,

                         au     ss
                  r A ufb Proze

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    d i
 In
                                                                                                              Der IVARO Tube Handler bildet die Basis für die sichere,
                                                                                                              schnelle und reproduzierbare Bearbeitung Ihrer Proben.

                                                                                                              • Entlastung bei monotonen
                                                                                                                Routineabläufen
                                                                                                              • Erhöhte Produktivität
                                                                                                                und Zuverlässigkeit
                                                                                                              • Maximale Transparenz
                                                                                                                und Sicherheit

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anz_ivaro_transskript_de_210x89_0122.indd 1                                                                                                                          28.01.2022 09:48:38
98 I laborwelt. Automation                                                                                                                        |transkript 1.2022

Echo 525 Acoustic Liquid Handler (links) und daneben die Echo ADE-Technologie (akustische Tröpfchendispensierung). Durch Schallwellen
werden kontaktlos und präzise Tropfen von der Quell-Mikrotiterplatte auf die darüber positionierte Ziel-Mikrotiterplatte dispensiert (acoustic
droplet ejection).

dass die Technologie ohne Pipettenspit-                    gezeigte Beispiel und die akustische                      unterstützen. Dabei verglich das Labor
zen auskommt, ermöglichen erhebli-                         Liquid-Handling-Technologie sind ein                      seinen bestehenden Standard-SARS-

                                                                                                                                                                        Bildnachweis: FRY Laboratories, LLC
che Kosteneinsparungen von ~50 % bei                       Präzedenzfall für künftige komplexe                       CoV-2-NGS-Detektionsassay mit einem
Mastermix und Einwegpipettenspitzen.                       molekulare Assays, nicht nur für den                      leicht modifizierten Protokoll, das die
Darüber hinaus wurden durch den Ein-                       Nachweis von SARS-CoV-2 mittels NGS.                      Miniaturisierung und die "Any-well-
satz des Echo 525 Verbesserungen in                          Fry Laboratories entschied sich für                     to-any-well"-Dispensierfähigkeiten
der Assay-Leistung beobachtet, insbe-                      den Echo 525 Acoustic Liquid Hand-                        des Echo 525 Liquid Handlers nutzt.
sondere hinsichtlich der Verringerung                      ler, um den Aufbau einer skalierbaren,                    Zusätzlich zu den unmittelbaren Zeit-
falsch positiver Ergebnisse. Das hier                      komplexen Multiplex-PCR-Reaktion zu                       und Spitzeneinsparungen war das

                                      Bioprofile FLEX2 optional mit On-Line Autosampler
                                      Vollautomatisierte Probenentnahme, Analyse und Systemkontrolle (Feedback) der Bioreaktoren
         Neu mit Probenrückstell-Automation                                                                        Probenentnahme und Analyse für bis zu
                                                                                                                   10 Zellkultur-Bioreaktoren
                                                                                                                   Kleines Bioreaktor-Probenvolumen für
                                                                                                                   16 Parameter
                                                                                                                   Schneller Probendurchsatz in 6 Minuten

                                                                                                                                  Erfahren Sie mehr im
                                                                                                                                  On Demand Webseminar

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